2023 Fiscal Year Research-status Report
時分割X線結晶構造解析によるアクチンATP加水分解反応の活写
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20K06522
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
武田 修一 岡山大学, 異分野基礎科学研究所, 特任助教 (50509081)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | アクチン / ATP加水分解 / X線結晶構造解析 / 細胞骨格 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
アクチン繊維は、ATP加水分解によってダイナミックに重合・脱重合を繰り返すことで、細胞運動の駆動力を産む。繊維中のアクチン分子は単量体(globular: G型)とは異なるF（filament）型コンフォメーションを取り（Oda, Nature, 2009）、ATP加水分解はF型アクチンのみで起こる。近年のクライオ電子顕微鏡技術の発展によって、3.1オングストローム分解能のアクチン繊維構造が報告されている（Merino, Nat Struct Mol Biol, 2018; Chou, PNAS, 2019）。しかしこれらの“近原子分解能”構造では、加水分解反応の肝である水分子は同定できない。タンパク質中の水分子位置の判別にはX線結晶構造解析が適しているが、その不定長の繊維に会合する性質ゆえ、これまでアクチン繊維の単結晶化は不可能であった。申請者は最近アクチン結合タンパク質との共結晶化によって、F型アクチンの高分解能結晶構造を決定することに成功した。本研究ではこの系を用いて、時分割X線結晶構造解析法によってアクチンATP加水分解を結晶中で捉えることを最終目標とする。ATPは生体内で最も普遍的に利用されているエネルギー通貨であり、その加水分解反応機構の解明はアクチン研究分野に留まらず、物質代謝や核酸合成など、細胞内で起こるATPをエネルギー源とする化学反応全般を理解する上で非常に重要である。また、F型アクチンシステムを利用して、アクチンATP加水分解反応に関して幅広い知見を得ることも目的とする。本年度はカルシウムイオンを配位したF型アクチンの結晶構造解析を試みた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
本年度においては細胞内に豊富に存在するマグネシウムイオンではなく、カルシウムイオンを配位したアクチンの結晶構造解析を行なったところ、興味深い構造変化が観察された。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後の目標として、異なるカチオン配位アクチン構造の同定を試み、さらにアクチン結晶中でのATP加水分解反応を経時的に観察する試みにも挑む予定である。
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| Causes of Carryover |
当初計画よりも進捗が遅れたため。残額は論文投稿費等に使用する予定である
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