2022 Fiscal Year Annual Research Report
細胞膜イノシトールリン脂質の反転の分子機構と癌悪性化におけるその機能の解明
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20K06563
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| Research Institution | Tokyo University of Pharmacy and Life Science |
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Principal Investigator |
米田 敦子 東京薬科大学, 生命科学部, 講師 (80590372)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | イノシトールリン脂質 / 癌 / 細胞接着 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
細胞膜は脂質２重層（細胞質側を内葉、細胞外側を外葉とよぶ）からなり、２層で脂質組成は異なる。内葉に多いホスファチジルセリンなどが一過的に細胞膜外葉へ反転することはアポトーシスや細胞膜融合などで知られているが、イノシトールリン脂質については未知であった。我々は、細胞膜内葉に局在するとされ、様々な細胞応答に働くホスファチジルイノシトール4,5-二リン酸（PIP2）が、細胞膜外葉にも局在することを見出していた。本研究では、細胞膜外葉への PIP2 の出現・反転機構、癌悪性化における細胞膜外葉 PIP2 の機能を明らかにすることを目的とした。2021年度までに、以下の成果をあげた。①様々な細胞種において、生細胞と固定化細胞両方で細胞膜外葉PIP2 の存在を示した。②新たにPIP2検出プローブを作成し、細胞膜外葉PIP2を定量する系を樹立した。③ヒトがん細胞の接着、遊走への細胞膜外葉PIP2の関与を示した。加えて、外葉 PIP2 量を制御する反転酵素を同定するため、外葉PIP2量の異なる細胞における脂質反転酵素の遺伝子発現解析を行い、外葉PIP2量と発現量が相関する酵素数種に絞り込んだ。2022年度は、複数の細胞種で候補酵素を発現抑制し、特定の細胞で外葉PIP2量が減少した候補酵素Aに絞り込んだ。また酵素Aの過剰発現細胞を作成し、外葉PIP2の増加を検出した。さらに、外葉PIP2依存的細胞接着関連受容体についても複数種の候補分子に絞り、発現抑制と細胞接着解析により候補分子Bに絞り込んだ。これらの結果の一部を国際学会で口頭発表した。
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