2020 Fiscal Year Research-status Report
Understanding the mechanisms by which Ctf4 protein suppresses repair of DNA double-strand breaks by homologous recombination
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20K06597
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
佐々木 真理子 東京大学, 定量生命科学研究所, 助教 (50722013)
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2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | Ctf4 / DNA複製阻害 / DNA二本鎖切断 / 相同組換え / ゲノム安定性 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
DNA複製は、遺伝情報を正確にコピーし娘細胞に引き継ぐために必須の過程である。しかしDNA複製は鋳型鎖上に存在する様々な障害によって妨げられ、DNA二本鎖切断(DNA double-strand break; DSB)が生じる。DSBは、ゲノム不安定化を誘導し癌や多くの疾患を引き起こす危険なDNA損傷である。しかし、複製阻害時のDSB修復機構は十分に理解されていない。申請者は先行研究において、複製装置の構成因子であるCtf4タンパク質は複製阻害によって生じたDSBが相同組換え経路によって修復されることを抑制することによってゲノム安定性を維持する因子であることを明らかにした。本研究課題では、Ctf4タンパク質がどのようなメカニズムで相同組換えによるDSB修復を抑制するのかを明らかにすることを目指している。
当該年度の研究では、野生型とCtf4タンパク質欠損株においてクロマチン免疫沈降実験を行うことによって、Ctf4タンパク質が欠損することによってDSB部位への結合量が変化するDNA複製因子を同定することができた。さらにこの因子をオーキシンデグロン法を用いて一過的に分解させるための株の構築および実験条件の確立にも成功したことから、次年度の研究において、この因子が複製阻害時のDSB修復に与える影響を解析するための実験系を確立することができた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
Ctf4タンパク質によるDSB修復制御において重要な役割を果たす可能性が期待される因子を同定することができた。さらにこの因子がDSB修復に与える影響を解析するための実験系の確立にも成功した。
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| Strategy for Future Research Activity |
2021年度の研究では、Ctf4タンパク質欠損時にDSBへの結合が減少するDNA複製因子がDSB修復に与える影響を解析する。さらに、クロマチン免疫沈降法を用いて、野生型とCtf4タンパク質欠損細胞における相同組換え因子やその他のDSB修復関連因子の結合パターンも比較する予定である。
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| Causes of Carryover |
新型コロナウィルスの感染拡大によってオンサイトでの学会が行われなかったため、旅費が発生しなかったため。
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