2020 Fiscal Year Research-status Report
GPR35-medaited suppression of degranulation of mast cells
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20K07040
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| Research Institution | Kyoto Pharmaceutical University |
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Principal Investigator |
田中 智之 京都薬科大学, 薬学部, 教授 (40303846)
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2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | GPR35 / マスト細胞 / クロモグリク酸ナトリウム |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、抗アレルギー薬であるクロモグリク酸ナトリウム(DSCG)の標的分子候補のひとつである三量体型Gタンパク質共役型受容体、GPR35に着目している。DSCGは消化管吸収率が低く、経口投与可能な抗アレルギー薬が期待されている。また、GPR35はGWAS解析からは炎症性腸疾患やⅡ型糖尿病との関係が示唆されており、新たな抑制性の受容体として注目されている。2020年度は、おもに発現系におけるそのシグナル伝達について解析を実施し、以下の成果を得た。
・HEK293細胞を用いたTGF-alpha shedding assayの実験系を用いた検討から、ヒト、ラット、マウスでアゴニストの活性に種差があることに加えて、Gタンパク質との共役プロフィールについても種差があることを見出した。
・ヒトGPR35とGalpha16 cDNAを同時にHeLa細胞にトランスフェクションすると、アゴニストに応答してCa2+応答が検出されることを確認した。
・従来用いられてきた培養マスト細胞株ではGPR35の発現は認められなかった。ラット腹腔マスト細胞では強いmRNA発現が確認された。
・マウス腹腔細胞をSCF存在下、培養し、ほぼ100%の純度で成熟マスト細胞のモデルを得ることに成功した。
・共同研究を通じたアゴニストスクリーニングをTGF-alpha shedding assayの実験系を用いて継続し、ヒトと齧歯類で同等の親和性をもつリガンドを複数見出した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
COVID-19の感染拡大の影響を受け、研究室での活動が制限されたことから実験量が減少し、影響を受けている。こうした環境の変化に対応した研究計画を再検討しており、2021年度以降にリカバリーする予定である。
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| Strategy for Future Research Activity |
共同研究を通じてGPR35遺伝子欠損マウスを利用することが可能となる見込みであり、in vivoにおける検証計画を見直している。研究計画についてはそれ以外の大きな変更は予定しておらず、遂行する上で解消するべき課題はない。
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| Causes of Carryover |
COVID-19の感染拡大を受け、研究活動が制限されたことから、研究計画の一部を見直し、2021年度に重点的に使用することにしたため。
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