2020 Fiscal Year Research-status Report
オータプス神経モデルを用いた女性ホルモン依存性疾患に対する漢方薬の網羅的解析
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20K07121
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Research Institution | Fukuoka University |
Principal Investigator |
窪田 香織 福岡大学, 薬学部, 講師 (60380557)
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Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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Keywords | ステロイドホルモン / 神経ステロイド |
Outline of Annual Research Achievements |
月経前や産後、更年期など女性ホルモンが顕著に変動している時期の女性の脳内では、受容体のサブタイプの発現変化やシナプス数の変化などの神経形態変化や、受容体の感受性の変化などによる神経伝達効率の低下など神経機能変化が生じ、月経前症候群(PMS)、産後うつ、更年期障害、記憶障害など脳機能低下につながっていると考えられている。しかし、これらの詳細な神経形態・機能変化は解析されていない。本研究では、PMSの病態解明や治療薬の効果検討を目的としたPMSモデル細胞の作成を目指した。 女性ホルモンのプロゲステロンは、脳内において神経ステロイドを合成し、GABA神経に作用する。神経ステロイドは、様々な生理的状態(ストレス、妊娠、老化)、心理的状態(うつ病、産後うつ病、月経前緊張症)、神経障害(月経随伴性てんかん)に関与しており、抗不安作用、鎮痛作用、抗けいれん作用、鎮静作用、催眠作用および麻酔作用があると言われている。数ある神経ステロイドの中でも、3α,21-Dihydroxy-5α-pregnan-20-one(THDOC)はGABAA受容体調節物質であり、GABAA受容体が強く応答する。 そこで初年度は、GABAA受容体調節物質であるTHDOCがGABA神経およびグルタミン酸神経に及ぼす影響についてオータプス培養標本を用いて形態学的に解析し、PMSモデルとしての妥当性を検討した。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
プロゲステロンは、脳内において神経ステロイドを合成し、GABA神経に作用するが、神経ステロイドの中でTHDOCはGABAA受容体調節物質であり、GABAA受容体が強く応答することが知られている。そこで、アストロサイト・単一ニューロン共培養モデルを用いてTHDOCがP1 ICRマウスの線条体由来GABA作動性神経および海馬由来グルタミン酸作動性神経に及ぼす影響について免疫染色法を用いて形態学的に検討した。THDOC 100 nM~100μMの範囲でそれぞれのニューロンに3日間処置したところ、グルタミン酸作動性神経においてTHDOC添加による形態学的変化は認められなかった。一方でGABA作動性神経のMAP2陽性樹状突起は障害された。しかし、PMSのモデルとしてはまだ確立していないので、今後はプロゲステロンについても同様の検討を進め、PMSモデル細胞としてのそれぞれの神経に関する知見を収集する。
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Strategy for Future Research Activity |
アストロサイト・単一ニューロン共培養モデルを用いて女性ホルモン変動で影響が出る関連物質の候補として初年度はTHDOCについて、線条体由来GABA作動性神経および海馬由来グルタミン酸作動性神経に及ぼす影響について免疫染色法を用いて形態学的に検討した。THDOC 100 nM~100μM処置によってGABA作動性神経には影響がでたが、グルタミン酸作動性神経において形態学的変化は認められなかった。そこで今年度は女性ホルモンであるプロゲステロンについても同様の検討を進め、PMSモデル細胞としてのそれぞれの神経に関する知見を収集し、PMSのモデルを構築したい。また、女性ホルモン関連疾患に対して臨床で用いられている漢方方剤を用いて、線条体由来GABA作動性神経および海馬由来グルタミン酸作動性神経に対する影響も併せて解析を始める。
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Causes of Carryover |
初年度の研究内容に若干の遅れが生じたため、購入予定のものの利用が次年度にずれこんだため。 培養モデルの構築(研究目的1)とニューロン形態や機能解析によるモデルの妥当性検証 (研究目的2)を初年度で主な実験を終了して初年度後半よりそのモデルを用いた生薬・天然化合物由来新規治療候補薬の探索およびニューロン形態・機能改善効果の検証(研究目的3)を実施する予定として初年度にサーマルサイクラーを計上していたが、次年度に開始時期がずれ込んだため、次年度にこの機器を購入する予定である。
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Research Products
(2 results)