2022 Fiscal Year Annual Research Report
Structure and function of spermatocyte nucleolus in the meiotic prophase; electron microscopic and molecular anatomical analysis
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20K07246
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
小路 武彦 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 客員研究員 (30170179)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
柴田 恭明 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 准教授 (80253673)
末松 貴史 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 技術職員 (70264249)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | 5-aza-2’-deoxycitidine / 精巣 / nucleolin / 核小体 / DNAメチル化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究ではこれまでに Pre-rRNA、18S rRNA、28S rRNA及び Spacer part 配列を標的としてin situ ハイブリダイゼーションを行い、電顕的に、また超解像顕微鏡を用いて解析を行ってきた。本年度は、2'-deoxycytidine アナログであり、DNA 脱メチル化を誘導する 5-aza-2'-deoxycitidine (5-azadC) を投与したマウスの精巣を試料として、精子形成細胞およびセルトリ細胞の核小体の変化を解析した。すなわち、リン酸緩衝液（PBS）に溶解した5-azadC（0.25 mg/kg）を毎日10日間、ICRマウス（7週齢）に腹腔内投与し、11日目に精巣を摘出し、4％ パラホルムアルデヒド/PBSで一晩、室温で浸漬固定し、パラフィンブロックを作製した。陰性対象として、PBSのみを同様に投与し、調整したマウス精巣を用いた。切片をオートクレーブで抗原賦活化したのち、抗 nucleolin 抗体を用いて免疫組織化学を行った。蛍光シグナルに関しては、DAPIで核染色後、超解像顕微鏡 (Eryla, Zeiss)にて検出した。その結果、5-azadC投与マウスの精粗細胞数は、対照マウスのそれに比して減少していたが、nucleolin 陽性スポットは両者ともに１つであり、大きさにも変化は認められなかった。5-azadC 投与マウス精母細胞に於けるnucleolin 陽性スポットは、対照マウスのそれに比して数の増加が認められた。セルトリ細胞核小体に於いては、nucleolin は辺縁に輪状に観察され、対照群、5-azadC 間で形態・強度共に差異はみられなかった。以上の結果は、DNAメチル化の減少が精母細胞でのリボゾーム転写活性を増加させることを示唆した。
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Research Products
(11 results)
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[Journal Article] Transcriptome proiling of anhidrotic eccrine sweat glands reveals that Olfactory receptors on eccrine sweat glands regulate perspiration in a ligand-dependent manner,2023
Author(s)
Murayama N, Miyaki T, Okuzaki D, Shibata Y, Koji T, Inoue A, Aoki J, Hayashi H, Tanaka Y, Murota H
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Journal Title
JID Innov
Volume: -
Pages: in press
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Compounds in cigarette smoke induce EGR1 expression via the AHR, resulting in apoptosis and COPD.2022
Author(s)
Hattori N, Nakagawa T, Yoneda M, Hayashida H, Nakagawa K, Yamamoto K, Myo Win Htun, Shibata Y, Koji T, Ito T
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Journal Title
J Biochem
Volume: 172
Pages: 365-376
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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