2021 Fiscal Year Research-status Report
トキソプラズマ感染成立に必須なリクルートソームの全貌の解明
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20K07472
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| Research Institution | National Institute of Infectious Diseases |
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Principal Investigator |
永宗 喜三郎 国立感染症研究所, 寄生動物部, 室長 (90314418)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | トキソプラズマ / 細胞内規制 / ミトコンドリア |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究ではまず、新たなリクルート因子候補として同定済みの2つの遺伝子産物が実際にリクルートに関与していることを、リバースジェネティクス的手法を用 いて明らかにする。これらの遺伝子は原虫の増殖に必須であることが示唆されているので、CHRISPR/CAS9系(mBio (2014), PLoS ONE (2014))を用いたノック アウト原虫の作製が不可能である可能性が高い。そこでこれらの遺伝子がノックアウトできなかった場合はテトラサイクリンを用いた発現制御系か、あるいは Destabilizing Domain(dd)の付与により Shield-1の有無で発現をコントロールできるコンディショナルノックアウトの系(Nat. Methods (2007))を用いて機能を 解析する。現在これらの作成に必要なコンストラクションの作成に成功し、あとは実際に原虫に導入するのみの状態となっている。
一方、最近申請者らが分離した臨床分離株は、先天性トキソプラズマ症患者から分離されたにもかかわらず、マウスに対して病原性を示さなかった。本分離株においてリクルート因子のひとつであるROP39のSNPsを調べたところ、リファレンス株であるME49との差違は認められなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
コロナ禍の影響のため
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| Strategy for Future Research Activity |
本年度はコロナ禍の影響もあり、当初の想定より若干の進捗遅れがある。しかしその遅れは次年度中には充分取り戻せる程度であると考えている。
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| Causes of Carryover |
コロナ禍のため研究の進捗に遅れが生じているため、昨年度および本年度の支出が当初の想定より少なくなっている。次年度は進捗の遅れを取り戻すために想定より多額の支出を必要としている。
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