デングウイルスレプリコン細胞を用いたウイルス複製制御機構の解明

2023 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K07532
• Research Institution: National Institute of Infectious Diseases
• Principal Investigator: 日紫喜 隆行 国立感染症研究所, 治療薬・ワクチン開発研究センター, 主任研究官 (30535761)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2025-03-31
• Keywords: デングウイルス / フラビウイルス / ウイルス複製機構 / レプリコン / 創薬標的

Outline of Annual Research Achievements

本研究では、デングウイルスレプリコン細胞や感染性ウイルスを用いてウイルス複製に関与する新規宿主因子を同定し、ウイルス複製制御機構を明らかにするとともに、抗ウイルス候補化合物を見出すことを目的としている。今年度はこれまでにレプリコン細胞を用いたsiRNAの導入実験において候補となった因子に関して、さらに別のターゲット配列を有するsiRNAを導入し解析をおこなったところ、ウイルス複製率の指標となる培養上清中のルシフェラーゼ活性が有意に減少するものが認められた。また、感染性デングウイルスを用いた実験系においても、siRNAによる候補因子の発現抑制によって細胞内のウイルスRNAが減少することが示された。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

候補因子の探索に予想以上に時間を要してしまったことから当初の計画に比べやや遅れている。

Strategy for Future Research Activity

絞り込んだ候補因子や抗ウイルス活性化合物によるデングウイルス複製への影響に関して追加実験を実施することで、より詳細なウイルス複製制御機構を解明する。
また、これまでの研究成果を学術論文として報告する。

Causes of Carryover

候補因子が複数見出され予想以上に解析に時間を要し、参加を予定していた学会での発表ができなかったため、物品費や旅費について次年度使用することにした。

Research Products

• [Journal Article] Mpox Neutralizing Antibody Response to LC16m8 Vaccine in Healthy Adults (2024)
  • Author(s): Morino E, Mine S, Tomita N, Uemura Y, Shimizu Y, Saito S, Suzuki T, Okumura N, Iwasaki H, Terada J, Ainai A, Sakai Y, Park E, Seki S, Akazawa D, Shimojima M, Shiwa-Sudo N, Virhuez-Mendoza M, Miyauchi K, Moriyama S, Iwata-Yoshikawa N, Harada M, Harada S, Hishiki T, ... Ujiie M.
  • Journal Title: NEJM Evidence Volume: 3 Pages: -
  • DOI: 10.1056/EVIDoa2300290
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Sofosbuvir Suppresses the Genome Replication of DENV1 in Human Hepatic Huh7 Cells (2024)
  • Author(s): Kurosawa M, Kato F, Hishiki T, Ito S, Fujisawa H, Yamaguchi T, Moriguchi M, Hosokawa K, Watanabe T, Saito-Tarashima N, Minakawa N, Fujimuro M.
  • Journal Title: International Journal of Molecular Sciences Volume: 25 Pages: -
  • DOI: 10.3390/ijms25042022
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Suppression of dengue virus replication by the French maritime pine extract Pycnogenol? (2024)
  • Author(s): Hossain KA, Akhter R, Rashid MHO, Akter L, Utsunomiya M, Kitab B, Ngwe Tun MM, Hishiki T, Kohara M, Morita K, Tsukiyama-Kohara K.
  • Journal Title: Virus Research Volume: 339 Pages: -
  • DOI: 10.1016/j.virusres.2023.199244
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Complement factor D targeting protects endotheliopathy in organoid and monkey models of COVID-19 (2023)
  • Author(s): Kawakami E,Saiki N,Yoneyama Y,Moriya C,Maezawa M,Kawamura S,Kinebuchi A,Kono T,Funata M,Sakoda A,Kondo S,Ebihara T,Matsumoto H,Togami Y,Ogura H,Sugihara F,Okuzaki D,Kojima T,Deguchi S,Vallee S,McQuade S,Islam R,Natarajan M,Ishigaki H,Nakayama M,Nguyen CT,Kitagawa Y,Wu Y,Mori K,Hishiki T, ... Takebe T.
  • Journal Title: Cell Stem Cell Volume: 30 Pages: -
  • DOI: 10.1016/j.stem.2023.09.001
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Identification of IMP Dehydrogenase as a Potential Target for Anti-Mpox Virus Agents (2023)
  • Author(s): Hishiki T, Morita T, Akazawa D, Ohashi H, Park ES, Kataoka M, Mifune J, Shionoya K, Tsuchimoto K, Ojima S, Azam AH, Nakajima S, Kawahara M, Yoshikawa T, Shimojima M, Kiga K, Maeda K, Suzuki T, Ebihara H, Takahashi Y, Watashi K.
  • Journal Title: Microbiology Spectrum Volume: 11 Pages: -
  • DOI: 10.1128/spectrum.00566-23
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] エムポックスウイルス複製に関与するイノシン一リン酸デヒドロゲナーゼの同定と創薬標的としての可能性 (2023)
  • Author(s): 日紫喜隆行、森田武志、赤澤大輔、大橋啓史、朴ウンシル、片岡紀代、御舩淳紀、塩野谷果歩、土本佳奈、小島新二郎、アア ハエルマン アザム、中嶋章悟、河原円香、吉河智城、下島昌幸、氣駕恒太朗、前田健、鈴木忠樹、海老原秀喜、高橋宜聖、渡士 幸一
  • Organizer: 第70回日本ウイルス学会学術集会
• [Presentation] デングウイルス及びC型肝炎ウイルス感染増殖を阻害するコレステロール誘導体の同定と作用機序の解析 (2023)
  • Author(s): 松田朋佳、日紫喜隆行、大橋啓史、山崎雅子、栗原僚己、Frank Stappenbeck、Feng Wang、Farhad Parhami、渡士幸一
  • Organizer: 第70回日本ウイルス学会学術集会
• [Presentation] 数理モデルを用いた抗サル痘ウイルス薬候補の定量的評価 (2023)
  • Author(s): 岩波翔也、山本将太朗、日紫喜隆行、赤澤大輔、大橋啓史、森田武志、渡士幸一、岩見真吾
  • Organizer: 第70回日本ウイルス学会学術集会