新規lncRNA ELIT-1によるHBV複製および肝がん悪性化の分子機構

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K07569
• Research Institution: Hamamatsu University School of Medicine
• Principal Investigator: 酒井 聡 浜松医科大学, 医学部, 助教 (50566081)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: lncRNA / HBV複製 / 肝がん悪性化

Outline of Annual Research Achievements

本研究の目的は、申請者が発見した長鎖ノンコーディングRNA（lncRNA） ELIT-1の機能解析に関して、（1）HBV複製時におけるELIT-1の誘導機構の解明、（2）ELIT-1によるHBV複製促進機構の解明、（3）ELIT-1を標的とした新たな治療薬創生を目指すことである。
（1）ELIT-1の誘導機構に関してはELIT-1 promoterを挿入したLuciferase assay系を用いて、HBVと宿主因子の相互作用による活性化機構がわかりつつある。（2）HBV複製促進機構においては、HBVの各種のプロモーターを挿入したLuciferase assay系を用いて解析したところ、ELIT-1による転写活性化が宿主因子の共発現によりさらに活性化される可能性が示唆された。（3）治療薬創生に関しては、構築したアッセイ系で化合物ライブラリースクリーニングを実施している。ELIT-1の発現を抑制する数種の候補化合物が見つかり、さらに解析を進めている。
これらの結果はHBV複製におけるELIT-1発現誘導と誘導されたELIT-1のHBV複製への寄与を示唆するものであり、今後の研究計画を遂行する上で重要な知見であると判断できる。また、スクリーニングにおいては今後の課題として詳細な解析を進める必要性があるものの、候補化合物を得ることができた点においては、研究実施計画通りに進展していると判断できる。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

申請当初の計画通りではない側面もあるが、アッセイ系の改良など今後の研究計画の実施に必要な実験系が構築できた点を考慮するとおおむね順調に進展していると判断した。

Strategy for Future Research Activity

ELIT-1の転写活性化、HBV複製促進ともに詳細な応答領域を解析するために、責任遺伝子に関してChIP-qPCRを用いて検証する。また、初年度実施できなかった網羅的解析（ChIP-SeqおよびRIP-Seq）を実施する。

Causes of Carryover

実験系を改善をしていたため、当初計画していた抗体の購入、受託解析が出来なかったため次年度使用額が生じた。