2021 Fiscal Year Research-status Report

消化器癌における近赤外光線免疫療法（NIR-PIT）の応用を目指した研究

Research Project

Project/Area Number	20K07654
Research Institution	Shinshu University
Principal Investigator	長屋匡信信州大学, 学術研究院医学系(医学部附属病院), 准教授 (00718033)
Project Period (FY)	2020-04-01 – 2023-03-31
Keywords	NIR-PIT / 食道癌 / 分子標的
Outline of Annual Research Achievements	新規癌治療法である近赤外光線免疫療法（NIR-PIT：near-infrared photoimmunotherapy）の消化器癌、特に食道癌や大腸癌に対する臨床応用を目指し、治療に使用できる可能性のある癌特異的抗原の発現状況を検討している。まず、食道癌患者さんの切除病理標本を用い免疫組織学的な検討を目的に症例の集積を行っている。NIR-PITは蛍光色素をつけた分子標的剤を静脈注射で投与したあとに標的腫瘍に近赤外光を当てるのみの治療法のため、充実臓器より管腔臓器の表面に生じる癌に特に有効であると思われ、消化器領域への特に内視鏡を用いたNIR-PITの臨床応用を目指している。当院で治療された食道癌の内訳として、内視鏡的粘膜下層剥離術（ESD）にて切除した表在型食道癌（深達度粘膜下層までの癌）の症例74例、また外科的に切除された進行食道癌（深達度筋層以深の癌）の症例を30例抽出した。また、別の期間に切除され、臨床経過を追うことができる食道癌60症例も抽出した。現在、頭頸部癌の治験に用いられている抗EGFR抗体につき実際の食道癌において早期癌・進行癌での発現の有無、発現程度など確認したが、食道癌への発現は50％程度であった。また、過去の報告で食道癌に発現が多いとされるGlypican-1の発現につき食道癌に特異的に発現をしているかにつき病理組織を免疫染色行ったが、食道癌以外の背景の正常粘膜への集積もかなりあり、NIR-PITの標的抗原としては適さないと判断した。現在は新たな抗原の検索を行っている。候補としてAno-1抗体が食道癌で発現している報告が少数例あり、同抗体での染色を開始している。 Ano-1の発現頻度が高い場合には、Ano-1を発現している食道癌のcll lineを用いてNIR-PITの有用性につき検討していく方針である。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 3: Progress in research has been slightly delayed. Reason 研究者自身において、研究以外の日常臨床の比重が多くなってきてしまい、研究にさける時間不足に加え、人手不足もあり、研究が遅れている。症例集積は終了したが、集積にかなりの時間を要してしまった。また、症例集積後の追加（未染色）の組織標本の作成に対して、人手と時間が足りていない。自動免疫染色機での染色が精度的には高く、時間的にも短時間で済むが、標本数や染色数が多いことからかかる費用が多くなるため、手動での染色により時間を要してしまっている。また、臨床用の蛍光内視鏡の開発や米国のNIR-PITを開発した研究室での実験や打ち合わせも行う予定であったが、COVID19感染拡大により、できていない。
Strategy for Future Research Activity	現在集積した食道癌の患者さんのリストをもとに、続けてさらに切除標本組織を抽出し、免疫染色を行っていく。また、食道癌において発現が予想されているEGFRは発現頻度が低く、Glypican-1については食道癌に発現頻度が多いものの、正常食道粘膜にも発現してしまっていることから、NIR-PITの標的とはなりにくいと判断している。他の食道癌特異抗原の検索を行っており、Ano-1という抗体について、現在免疫染色を開始している状況である。また、その他の特異抗原の有無についても、可能な限り切除標本に対して免疫染色を行い、どの程度の頻度で抗原が発現しているかについても併せて検討する。早期癌と進行癌での特異抗原の発現頻度の差違についても検討していく。その上で、実際に近赤外光線免疫療法が可能かどうかを細胞実験や動物実験で検証していく。
Causes of Carryover	症例の集積に時間を要したことで、実際の食道癌病理組織標本に対する免疫染色や標本作製が遅れたことで、必要な特異抗体の購入や免疫染色などにかかる経費が少なくなった。現在集積症例数も増えており、次年度には多くの抗体の購入や免疫染色に対する経費がかかる予定である。また、NIR-PITに適した特異抗原が同定できれば、cell lineの購入やin vitro実験を開始していくためにさらなる費用が必要となる。