2021 Fiscal Year Research-status Report
免疫介在性ニューロパチーの疾患活動性を反映する新規バイオマーカーの開発
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20K07864
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
飯島 正博 名古屋大学, 医学部附属病院, 特任准教授 (40437041)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小池 春樹 名古屋大学, 医学系研究科, 准教授 (80378174)
勝野 雅央 名古屋大学, 医学系研究科, 教授 (50402566)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | 免疫介在性ニューロパチー / 慢性炎症性脱髄性多発神経炎（CIDP） / バイオマーカー / Neurofascin-155 / 自己抗体 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的は、免疫介在性ニューロパチーである慢性炎症性脱髄性多発神経炎（以下、CIDP）の病態解明と治療の適正化である。背景としてCIDPは再発性もしくは進行性経過を示す慢性疾患であり、病態多様性が指摘される上に病勢を反映するバイオマーカーはこれまで未開発にある。一方、神経領域疾患におけるニューロフィラメント-light(NF-L)は軸索障害を反映する新規マーカーとして、中枢ならびに末梢神経疾患を問わず、様々な病態に共通して期待されることから、本研究ではこれを用いて治療反応性ならびに病勢の反映の有無を検証する。CIDP患者の病極期ならびに治療後における血清NF-Lを測定し、CIDPの各亜型と正常コントロール例、臨床スコア、 神経伝導検査所見、神経生検の病理所見との関連性を解析した結果、NF-Lは正常コントロールより有意な増加を示すとともに、mRSスコアと髄液蛋白と正の相関を認めた。また、免疫療法への抵抗性を示すIgG4自己抗体(抗NF155抗体)陽性例は陰性例と比較し高値を示した。神経伝導検査所見では、NF-Lは脛骨神経の複合筋活動電位振幅と負の相関を示し、神経生検の病理所見からは軸索変性に強い相関を示した。
さらに、IgG4自己抗体以外の未知の自己抗体の可能性を検証するため、人ならびにマウス神経サンプルに対する患者血清の反応性をwestern-blotで確認したところ、いくつかの候補バンドを確認できた。これをゲルから切り出し質量解析を行うことでミトコンドリア構成成分に特異的に反応しうる自己抗体が確定されつつある。この自己抗体を有する患者の臨床的特徴としては感覚性運動失調を伴う例が多く、マウス後根神経節における反応性も極めて強いことが確認されている。今後は本抗体が病勢を反映するものか、病因となりうるかの検証を進める予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本研究は2つのアプローチにより、CIDPをはじめとする免疫介在性ニューロパチーの病態解明と新規バイオマーカー候補を探索する。1つはCIDP患者血清を用いた超精密ELISA(Simoa system)によりCIDPにおけるNF-Lの変動を鑑別疾患ならびに各亜型間で重症度、神経伝導検査、生検病理所見との相関解析により評価し、疾患活動性・病勢評価としての有用性を検証し論文化した。
さらに、未知の自己抗体の可能性を検証するため、マウスならびに人神経サンプルに対し、既知の自己抗体が陰性のCIDP患者からの血清をwestern-blotで反応させ、検出された陽性バンドを切り出し、質量解析により候補標的分子を特定した。複数の候補からミトコンドリアの構成成分を標的とする自己抗体が示された。これはCBAによる反応性、ならびにマウス後根神経節を用いた検証からも反応性が確認された。本自己抗体を有する患者の共通点として、感覚優位の障害ならびに感覚性運動失調を伴うことが判明しつつある。IVIgへの治療反応性は比較的良好であることから、本抗体はIgG4サブクラス抗体のように補体やFcを介したエフェクター惹起ではなく、Fc領域を介した細胞性免疫の介在が示唆されている。
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| Strategy for Future Research Activity |
感覚優位性CIDPにおける新たな診断的バイオマーカーとして今回ミトコンドリア構成成分に反応しうる候補自己抗体を特定した。今後、本抗体が病因となりうるのか、もしくは障害神経から二次的に検出されうるものかの検証を続ける。新規の自己抗体を含め、CIDPの病態に何らかの自己抗体の関与が示唆される結果が示されつつあることから、今後は補体活性を検証するELISAプレートをカスタマイズし、これに患者血清を反応させることで、障害をきたすエフェクター候補として補体系の関与の有無を検証する予定である。
また、CIDPスモデルに関しては、完全型グロブリンによる免疫修飾を確認したことから、今後はFcやF(ab')2といった断片化グロブリンを人為的に作製した結果、免疫グロブリン製剤における免疫調整作用は、F(ab')2ではなく、Fc領域に依存することが示されつつある。今後の人為的グロブリンによる免疫調整薬といての理論的な根拠を提供しうる知見であり、NOD B7-2 knockout miceをはじめとするCIDPモデルを用いた今後も検証を積み上げる予定である。
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