セシウムがインフルエンザウイルス・RSウイルス感染に及ぼす影響

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K08180
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 山下 信子 岡山大学, 医学部, 客員研究員 (40379798)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小川 寛人 岡山大学, 医歯薬学域, 助教 (80455237) [Withdrawn] ; 八代 将登 岡山大学, 大学病院, 助教 (80585943) ; 難波 ひかる 岡山大学, 医歯薬学域, 助教 (20273972) [Withdrawn] ; 本田 知之 岡山大学, 医歯薬学域, 教授 (80402676)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: インフルエンザウイルス / セシウム

Outline of Annual Research Achievements

今年度は、安定同位体セシウム（Cesium；Cs）添加時の細胞毒性評価とインフルエンザウイルス（IAV）の増殖に及ぼす影響を検討した。細胞毒性評価はMTT（3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide）assayを用いた。MEM培地にCsClを０, 0.1, 0.3，1, 3, 10, 30mMで添加した場合の吸光度（A570- A650）で評価し、A549細胞とHEK293T細胞で検討を行った。添加48時間後ではCsCl 添加　0.1～3ｍＭの生細胞率はA549細胞とHEK293T細胞のいずれも80％を超えていた（CsCl (-)を100％とした場合）。しかし、CsCl 10mMを超えると著しい細胞障害が認められた。次に、細胞障害を起こさない低濃度のＣsＣl添加時(0, 0.1, 0.5, 1ｍM)のポリメラーゼ活性への影響を検討するために、インフルエンザウイルスのミニゲノムアッセイ（pCAGGS-PB2,PB1,PA, NP (A/WSN/1933(H1N1))とNP分節NCRを持つルシフェラーゼ遺伝子をコードするpPolI-NP(0)Fluc(0) をHEK293T細胞にトランスフェクションし、転写・翻訳されるルシフェラーゼを測定）を行った。Relative Luciferase Activityは、CsCl 0ｍMを1とした場合、0.1ｍM　1.47、0.5ｍM　1.14、1ｍM　1.14（mean）であり有意差は認められなかった。このことから低濃度CsCｌ添加は、IAVのポリメラーゼ活性には影響を及ぼさないと考えられた。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

インフルエンザウイルスに及ぼす影響の検討がほぼ終わったため。

Strategy for Future Research Activity

次年度は、セシウムがRSウイルス増殖に及ぼす影響を検討する。また研究最終年度となるため、研究のまとめを行う。

Causes of Carryover

新型コロナウイルス流行による規制のため、研究実施に多少の遅れが生じたことが理由である。しかし、今年度できなかったRSウイルスの実験系の立ち上げなどに、今年度使用する予定である。