網羅的micro-RNA解析による川崎病遠隔期冠動脈病変リモデリング機序の解明

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K08190
• Research Institution: Wakayama Medical University
• Principal Investigator: 垣本 信幸 和歌山県立医科大学, 医学部, 助教 (90614412)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 鈴木 啓之 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (80196865) ; 武内 崇 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (10246522) [Withdrawn] ; 末永 智浩 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (70433365) ; 鈴木 崇之 和歌山県立医科大学, 医学部, 助教 (40816691) ; 土橋 智弥 和歌山県立医科大学, 医学部, 学内助教 (20828488)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 川崎病 / 冠動脈瘤 / 光干渉断層法 / miRNA

Outline of Annual Research Achievements

川崎病の後遺症としての冠動脈病変は遠隔期に狭窄性病変へと進行することがあるが、有効な予防策も内科的治療法も確立されていない。冠動脈病変を有する遠隔期症例では、光干渉断層法（OCT）を用いた検討で、冠動脈壁に中膜断裂、内膜肥厚、石灰化が存在し、血管栄養血管であるVasa Vasorumが増加している。本研究ではこれらの冠動脈病変の変化がなぜ生じるのかを解明するために、末梢血を用いて網羅的micro-RNA（miR）測定を行い、冠動脈病変症例で発現が増減しているmiRを同定し、これらのmiRの作用部位と、形態的評価としてのOCT所見を比較して内膜肥厚や石灰化などの病変進行の機序の解明を目指す。外来経過観察中の冠動脈病変を有する症例で経過観察の冠動脈造影検査（CAG）が必要な症例に対して、CAG施行時に同時にOCTを施行する。得られたOCT画像と、これまでにOCTを施行した外来経過観察中の冠動脈病変を有する症例を統合して、冠動脈データ（内膜厚の測定、中膜断裂像の有無、石灰化の有無、狭窄性病変の有無、Vasa Vasorumの定量）を得る。すでにOCTを施行している症例が23例あるため、さらに約10例の症例を追加し、合計で約30例の症例で上記の内容について詳細に解析できる予定である。
現在、対象となる患者の血液サンプルの採取、保管を行っている状況である。今後、miRNAの抽出を行い、候補となったmiRに関して、本研究室に現有するTakara Thermal Cycler Dice Real Time Systemを用いてreal time RT PCRを行いmiRの半定量的測定を行う。また、OCT画像の解析も並行して施行している状況である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

対象となる患者の血液検体、OCT画像の解析を並行して施行中である。
症例数はおおむね計画通りに得ることができている。

Strategy for Future Research Activity

さらに症例数を増やし、血液検体が十分に回収できた時点で、miRNAの抽出、網羅的なmiRNA解析に進む予定である。その後、OCT画像との比較検討を行う予定である。

Causes of Carryover

当初購入を計画していた機材を他の資金で調達することができた点と、全国的なコロナウイルス感染症による学会のオンライン化により、出張旅費としての出費を抑制することができたため、当該年度の直接経費に残預金が生じた。
研究資金は、次年度以降に試薬等の購入資金として使用予定である。