2021 Fiscal Year Research-status Report
エリスロポエチンの腎線維化と間質浸潤マクロファージに及ぼす影響の検討
| Project/Area Number |
20K08263
|
|---|
| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
|---|
Principal Investigator |
西田 眞佐志 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 客員教授 (50275202)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
|
| Keywords | 腎線維化 / エリスロポエチン / 片側尿管結紮 / M1マクロファージ / M2マクロファージ |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
マウス片側尿管結紮（UUO）モデルにおいて、UUO後期（day 7-13）にリコンビナント・ヒト・エリスロポエチン（Epo）1000 U/kgの連日腹腔内投与を行い、腎線維化、間質マクロファージ浸潤などに関する検討を継続して行った。UUO day14において、Epo投与群では、腎組織マッソン染色および腎組織抽出液中hydroxyproline定量による評価により腎線維化の軽減を認め、同時に腎組織α-smooth muscle actin（α-SMA）免疫染色、腎組織抽出液によるウエスタンブロットによりα-SMAの発現低下を認めた。腎組織より抽出したtotal RNAを用いたRT-PCR法による検討では、腎組織中１型collagen mRNA発現の低下を認めたが、TGF-β mRNAについては有意な変化を認めなかった。
また、マクロファージ浸潤については、腎組織免疫染色およびウエスタンブロット法により、Epo投与による間質浸潤F4/80陽性マクロファージ数の減少、CD86陽性M1マクロファージ数の減少、およびCD206陽性M2マクロファージ数の増加が確認できた。
さらにEpo投与による末梢血ヘマトクリットへの影響を検討したところ、UUO day0,7,14において有意な変化は認められなかった。
今回の結果よりEpoは腎線維化出現以降のUUO後期からの投与でも腎線維化の進展抑制および軽減作用を有する可能性が示唆され、腎線維化治療に対する臨床応用を念頭に置いた場合、極めて重要な知見と考えられる。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
Epoの腎線維化および間質浸潤マクロファージに及ぼす影響につき、UUOを用いた腎線維化モデルにおいてUUO後期におけるEpoの投与で興味深い知見が得られた。今後、Epoのマクロファージを介する腎線維化抑制作用について研究を進める端緒となる知見である。
|
| Strategy for Future Research Activity |
研究実績の概要にて述べたUUOモデルにおけるEpo投与の腎線維化および間質浸潤マクロファージに対する影響の機序につきさらに検討を進める予定である。具体的には、Epo投与によるKeap1-Nrf2系などの腎線維化関連因子への影響についての検討、腎組織よりの単離マクロファージを用いたEpoのマクロファージに及ぼす影響のin vitroでの検討、などを進めていく予定である。
|
| Causes of Carryover |
マウスを用いた動物実験において、RT-PCRによるmRNA発現の解析などを当初外部委託にて行う予定であったが、primerを用い当研究室内で施行したため、残預額を次年度の動物購入費、免疫染色、ウエスタンブロット、RT-PCRなどの試薬購入費として使用する予定とした。
|
Research Products
(2 results)
