Investigation of tumor immune escape mechanisms in liver cancer using allograft mouse model

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K08276
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 千葉 哲博 千葉大学, 大学院医学研究院, 講師 (00381583)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 金山 健剛 千葉大学, 医学部附属病院, 医員 (20835102)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 腫瘍微小環境

Outline of Annual Research Achievements

通常の癌研究においては、株化癌細胞や患者切除検体を免疫不全マウスに移植する異種移植マウスモデルは極めて重要であるが、リンパ球などの免疫担当細胞を欠損しているために、
腫瘍免疫を扱う際のマウスモデルとしては不適切である。そこで、Hepa1-6細胞とC57BL/6野生型マウス、およびH22細胞とBalb/cマウスの組み合わせの同種移植マウスモデルを作成することで、腫瘍内微小環境の評価系の樹立をを試みた。
その結果、移植後2週間後に担癌マウスの腫瘍組織をコラゲナーゼ分離により分散し、比重遠心法や磁気細胞分離法により腫瘍細胞、血管内皮細胞、免疫担当細胞（細胞障害性T細胞、制御性T細胞、NK細胞、M2マクロファージなど）を単離することが可能となった。現在は、フローサイトメトリーを用いた実験に着手している。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

COVID-19の影響により海外からの試薬類などの購入に時間を要したため、多少の遅れが生じている。

Strategy for Future Research Activity

フローサイトメトリーを用いて、腫瘍構成細胞の各細胞画分のRNA-seqによる網羅的遺伝子発現解析やT細胞機能（Ki-67発現、グランザイムB産生能）の評価を行う。またサイトカインアレイを用いてIFN-γ, TNF-alpha、VEGFなどのサイトカイン濃度を網羅的に測定する。

Causes of Carryover

PCR関係試薬の納品が遅れ、令和2年度の研究費に未使用額が生じた。金額としては小さいものであり、予定通り令和3年度の研究計画ｖ実施する。

Research Products

• [Journal Article] The efficacy of linked color imaging in the endoscopic diagnosis of Barrett’s esophagus and esophageal adenocarcinoma. (2020)
  • Author(s): Tokunaga M, Matsumura T, Ishikawa K, Kaneko T, Oura H, Ishikawa T, Nagashima A, Shiratori W, Okimoto K, Akizue N, Maruoka D, Ohta Y, Saito K, Nakagawa T, Chiba T, Arai M, Kato J, Kato N.
  • Journal Title: Gastroenterol Res Pract Volume: 2020 Pages: 9604345
  • DOI: 10.1155/2020/9604345.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Analyses of intermediate-stage hepatocellular carcinoma patients receiving TACE prior to designing clinical trials. (2020)
  • Author(s): Koroki K, Ogasawara S, Ooka Y, Kanzaki H, Kanayama K, Maruta S, Maeda T, Yokoyama M, Wakamatsu T, Inoue M, Kobayashi K, Kiyono S, Nakamura M, Kanogawa N, Saito T, Kondo T, Suzuki E, Nakamoto S, Yasui S, Tawada A, Chiba T, Arai M, Kanda T, Maruyama H, Kato J, Kuboki S, Ohtsuka Miyazaki M, Yokosuka O, Kato N.
  • Journal Title: Liver Cancer Volume: 9 Pages: 596－612
  • DOI: 10.1159/000508809.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] A randomized, double-blind, placebo-controlled, phase 3 study of tivantinib in Japanese patients with MET-high hepatocellular carcinoma. (2020)
  • Author(s): Kudo M, Morimoto M, Moriguchi M, Izumi N, Takayama T, Yoshiji H, Hino K, Oikawa T, Chiba T, Motomura K, Kato J, Yasuchika K, Ido A, Sato T, Nakashima D, Ueshima K, Ikeda M, Okusaka T, Tamura K, Furuse J.
  • Journal Title: Cancer Sci Volume: 111 Pages: 3759－3769
  • DOI: 10.1111/cas.14582.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Interferon-γ induced PD-L1 expression and soluble PD-L1 production in gastric cancer. (2020)
  • Author(s): Imai Y, Chiba T, Kondo T, Kanzaki H, Kanayama K, Ao J, Kojima R, Kusakabe Y, Nakamura M, Saito T, Nakagawa R, Suzuki E, Nakamoto S, Muroyama R, Tawada A, Matsumura T, Nakagawa T, Kato J, Kotani A, Matsubara H, Kato N.
  • Journal Title: Oncol Lett Volume: 20 Pages: 2161－2168
  • DOI: 10.3892/ol.2020.11757.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] PD-L1 is induced on hepatocyte surface via CKLF-like MARVEL transmembrane domain-containing protein 6 upregulation by the anti-HBV drug Entecavir. (2020)
  • Author(s): Yamamoto Y, Kakizaki M, Shimizu T, Carreras J, Chiba T, Chamoto K, Kagawa T, Aoki T, Nakamura N, Ando K, Kotani A.
  • Journal Title: Int Immunol Volume: 32 Pages: 519－531
  • DOI: 10.1093/intimm/dxaa018.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Long-term administration of Tolvaptan to patients with decompensated cirrhosis. (2020)
  • Author(s): Kanayama K, Chiba T, Kobayashi K, Koroki K, Maruta S, Kanzaki H, Kusakabe Y, Saito T, Kiyono S, Nakamura M, Ogasawara S, Suzuki E, Ooka H, Yasui S, Nakamoto S, Kanda T, Maruyama H, Kato J, Kato N.
  • Journal Title: Int J Med Sci Volume: 17 Pages: 874－880
  • DOI: 10.7150/ijms.41454.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Sequential therapy with sorafenib and regorafenib for advanced hepatocellular carcinoma: a multicenter retrospective study in Japan. (2020)
  • Author(s): Ogasawara S, Ooka Y, Itokawa N, Inoue M, Okabe S, Obu M, Atsukawa M, Itobayashi E, Mizumoto H, Sugiura N, Azemoto R, Kanayama K, Kanzaki H, Maruta S, Maeda T, Kusakabe Y, Yokoyama M, Kobayashi K, Kiyono S, Nakamura M, Saito T, Suzuki E, Nakamoto S, Yasui S, Tawada A, Chiba T, Arai M, Kanda T, Maruyama H, Kato N
  • Journal Title: Invest New Drugs Volume: 38 Pages: 172－180
  • DOI: 10.1007/s10637-019-00801-8.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Potential of Lenvatinib for an Expanded Indication from the REFLECT Trial in Patients with Advanced Hepatocellular Carcinoma. (2020)
  • Author(s): Maruta S, Ogasawara S, Ooka Y, Obu M, Inoue M, Itokawa N, Haga Y, Seki A, Okabe S, Azemoto R, Itobayashi E, Atsukawa M, Sugiura N, Mizumoto H, Koroki K, Kanayama K, Kanzaki H, Kobayashi K, Kiyono S, Nakamura M, Kanogawa N, Saito T, Kondo T, Suzuki E, Nakamoto S, Tawada A, Chiba T, Arai M, Kanda T, Maruyama H, Kato N.
  • Journal Title: Liver Cancer Volume: 9 Pages: 382－396
  • DOI: 10.1159/000507022.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Free fatty acid-based low-impedance liver image: a characteristic appearance in nonalcoholic steatohepatitis (NASH). (2020)
  • Author(s): Maruyama H, Kobayashi K, Kiyono S, Chiba T, Kato N, Ohtsuka M, Ito K, Yamaguchi T, Shiina S.
  • Journal Title: Eur Radiol Exp Volume: 4 Pages: 3
  • DOI: 10.1186/s41747-019-0137-y.
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] 血清FGF19・VEGF値からみた進行肝癌症例におけるソラフェニブ及びレンバチニブの治療反応性と病勢進行に伴う変化の検討 (2020)
  • Author(s): 神崎洋彰，千葉哲博，加藤直也
  • Organizer: 第43回日本肝臓学会東部会
• [Presentation] 肝細胞癌における可溶型PD-L1の特性および分泌機序の検討 (2020)
  • Author(s): 神崎洋彰，千葉哲博，加藤直也
  • Organizer: 第24回日本肝臓学会大会
• [Presentation] 同種移植肝癌モデルマウスを用いたマルチキナーゼ阻害剤の肝癌微小環境への影響の検討 (2020)
  • Author(s): 金山健剛，千葉哲博，加藤直也
  • Organizer: 第56回日本肝臓学会総会
• [Presentation] 肝癌のMKI治療におけるFG19及びVEGFの血清バイオマーカーとしての意義 (2020)
  • Author(s): 千葉哲博，神崎洋彰，加藤直也
  • Organizer: 第56回日本肝癌研究会
• [Presentation] Serum angiopoietin 2 as a diagnostic and prognostic biomarkers in hepatocellular carcinoma. (2020)
  • Author(s): Chiba T，Ao J，Kanzaki H，Shibata S，Kakiuchi R，Sakaue A，Qiang N，Ma Y，Kanayama K, Kojima R，Kusakabe Y，Nakamura M，Saito T，Nakagawa R，Kondo T，Ogasawara S，Suzuki E，Muroyama R，Kondo T，Maruyama H，Kato J，Kato N.
  • Organizer: 米国肝臓学会議 2020
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Potential as biomarkers of circulating cell-free DNA. (2020)
  • Author(s): Kanzaki H，Chiba T，Unozawa H，Iwanaga T，Sakuma T，Fujita N，Koroki K，Kobayashi K，Kiyono S，Nakmaura M，Kanogawa N，Kondo T，Saito T，Nakagawa R，Ogasawara S，Suzuki E，Muroyama R，Nakamoto S，Tawada A，Kato N.
  • Organizer: 米国肝臓学会議 2020
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] An improved diet-induced murine model for nonalcoholic fatty liver disease with rapid progression of steatohepatitis and fibrosis. (2020)
  • Author(s): Nakmaura M，Chiba T，Sakuma T，Iwanaga T，Fujita N，Ao J，Ma Y，Kanayama K， Kanzaki H，Koroki K，Kobayashi K，Nakagawa R，Kanogawa N，Kiyono S，Kondo T， Saito T，Ogasawara S，Ooka Y，Suzuki E，Nakamoto S，Muroyama R，Kato N.
  • Organizer: 米国肝臓学会議 2020
  • Int'l Joint Research