2020 Fiscal Year Research-status Report
Development of treatment for intractable portal vein thrombosis targeting intestinal flora-related coagulation disorders
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20K08280
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
鷹取 元 金沢大学, 附属病院, 助教 (60613734)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
飯田 宗穂 金沢大学, 附属病院, 助教 (40705604)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | 門脈血栓 / 肝硬変 / 腸内細菌叢 / 再発因子 / 抗凝固療法 / 予後予測 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
腸内細菌叢と門脈血栓症、肝硬変症との相関に関する研究の研究計画書および説明同意文書を作成し、金沢大学医学倫理委員会の承認を得た（承認番号2020-061 公No： UMIN000043536）。
同意を得ることができた症例から抗凝固療法をおこなう前後で便試料および血液試料を採取している。門脈血栓症例は肝硬変の10%程に合併する病態であり、その症例数は決して多くはないが、目標の40症例に向けて順調に集積している。またこれら症例の臨床的特徴（Child-Pugh score、血中凝固マーカー、食道胃静脈瘤の程度、肝硬度、門脈血流速度、抗凝固治療による血栓体積の変化）についてデータを集積している。今後は症例集積後に便試料より腸内細菌叢を、血液試料よりLPSおよび血中細菌を解析し、臨床的な抗凝固療法の成果と腸内細菌叢の相関についてあきらかにする。
難治の門脈血栓患者で増減している腸内細菌、血中細菌を明らかとし、その上で、それら細菌の増減が特徴的な難治例の便をC57BL6無菌マウスに移植する。また門脈内皮細胞にLPSや細菌による内皮細胞障害が存在するか確認する。
門脈血栓症５２例の臨床経過を後ろ向きに解析し、門脈血栓症が有意に再増悪しやすい臨床的な特徴として、血栓の体積が3.0mL以上であること、Child-Pugh scoreが8点を超えること、FIB-4indexが7点以下であることをあきらかとし、論文(Life (Basel). 2020 Sep 4;10(9):177. doi:10.3390）および国内学会（第56回日本肝臓学会総会、第27回日本門脈圧亢進症学会総会、日本消化器病学会週間2020）で発表した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
便試料および血液試料の臨床サンプルの集積は順調であるが、ある程度集積してから解析するため、まだ解析には至っていない。
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| Strategy for Future Research Activity |
採取した便からDNAを抽出し、シーケンサを用いて細菌の同定を行う。便のプロテアーゼ活性を測定する。また、採取した血液より血中LPS、血漿中DNAを抽出し血中細菌を同定する。
これら便と血液から得られた情報と、門脈血栓症に対する抗凝固の治療効果や再燃などの臨床経過と細菌関連データの相関を解析する。
血栓の臨床経過と関連がある腸内細菌叢の比較検討のため、それら特徴を有する一部検体をもちいてマウスへの便移植をおこない、生体への影響を解析する。
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| Causes of Carryover |
今年度は研究計画を立ち上げ、門脈血栓に対する抗凝固薬治療の臨床研究および症例の集積および臨床検体（便および血液）、臨床情報の収集を行っている。次年度は集積した便検体および血漿検体よりDNAを抽出し16SrRNA増幅シーケンシングから血中細菌を同定する。それら研究にあたり遺伝子解析キットを購入予定である。
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