2021 Fiscal Year Research-status Report
Project/Area Number |
20K08348
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Research Institution | Hokkaido University |
Principal Investigator |
武田 宏司 北海道大学, 薬学研究院, 名誉教授 (60261294)
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Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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Keywords | グレリン受容体 / サーチュイン |
Outline of Annual Research Achievements |
GHSR1a発現細胞(GHSR1a安定発現HEK293細胞)を用い、グレリン刺激による細胞内SIRT1 mRNAおよび蛋白量の増加を、qRT-PCRおよびウェスタンブロットで確認した。次に、SIRT1/3の標的蛋白のひとつであるp53に対するアセチル化特異抗体(Ac-K382抗体)用いたウェスタンブロットで標的蛋白のアセチル化状態を評価した。その結果、グレリン刺激によりアセチル化p53が減少したことから、細胞内SIRT1活性が上昇した可能性が示唆された。さらに、ミトコンドリア画分を分離し、ミトコンドリアに局在するp53のアセチル化状態を検討したところ、グレリン刺激によりミトコンドリア局在p53のアセチル化状態が著明に減少した。以上の結果より、グレリン刺激によって細胞質~ミトコンドリア近傍に局在するSIRT1が活性化され、ミトコンドリアp53を脱アセチル化したことが示唆された。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
保存されていたGHSR1a安定発現HEK293細胞の生存率が低下したため。
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Strategy for Future Research Activity |
生存率の高いGHSR1a安定発現HEK293細胞を確保することを最優先とする。さらに、内在性にGHSR1aを発現しているとされるHUVECについて同様の検討をおこなう
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