2022 Fiscal Year Annual Research Report
心臓特異的な血管内皮細胞のアンギオクライン因子と分子学的特徴の解明
| Project/Area Number |
20K08397
|
|---|
| Research Institution | Chiba University |
|---|
Principal Investigator |
横山 真隆 千葉大学, 大学院医学研究院, 助教 (20514871)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
|
| Keywords | アンギオクライン因子 / 心疾患 / 心臓血管内皮細胞 / 心筋細胞 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、マウス臓器間比較によって得られた心臓血管内皮細胞特異的な転写因子に着目して、臓器特異的な血管内皮細胞の機能を解析している。マウス心臓から単離した血管内皮細胞をシングルセル解析し、申請段階で選び出していた4つの転写因子の相互発現を確認した。４つの転写因子は全ての血管内皮細胞に同様に発現しているものではなく、ヘテロな組み合わせを構築していた。次にChIPseq/ATACseqのデータ解析から、それぞれの転写因子が異なる直接的制御機構を構築していることを明らかにした。特にその一つは、他の転写因子と異なりプロモーター付近の結合が豊富でありコアプロモーターとして機能している可能性が示唆された。これらをもとに、様々な転写因子の組み合わせ過剰発現細胞株を作成し、傷害心筋への移植モデルを用いて重要な因子の絞り込みに取り組んだ。その結果、4因子のうち2因子が生着に必須であること、また付随する3つ目の因子によって分子発現パターンが異なることを明らかにした。
最後に、過剰発現によって作成したリプログラミング心臓血管内皮細胞の心筋細胞への機能を明らかにするために共培養実験によって心筋細胞の分子発現を解析した。その結果、細胞増殖に関わる分子発現に変動が見られ、実際にKi67と用いた増殖実験においても胎児心筋細胞の増殖が確認できた。マウス心筋障害モデルへの移植では、心臓収縮能の改善を認め心筋細胞への波及作用が示唆された。それにかかわる因子のノックダウンにより寄与分子の探索を行なったが、有意な因子は現段階では見出せていない。移植された心筋細胞で変化した遺伝子発現の解析データからエフェクター分子の抽出を継続しており、本研究の結論を報告する。
|
