がん幹細胞と老化細胞を標的とした分子標的治療薬耐性の克服

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K08518
• Research Institution: Kobe University
• Principal Investigator: 立原 素子 神戸大学, 医学研究科, 講師 (40448626)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 西村 善博 神戸大学, 医学部附属病院, 教授 (20291453) ; 山本 正嗣 神戸大学, 医学部附属病院, 助教 (40542139) ; 小林 和幸 神戸大学, 医学部附属病院, 特命教授 (50403275) ; 永野 達也 神戸大学, 医学研究科, 助教 (80624684)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 肺がん / 形質転換

Outline of Annual Research Achievements

上皮成長因子受容体（EGFR）などの特定の遺伝子の変異によって生じる肺がんに対して、そのチロシンキナーゼ阻害剤（TKI）は劇的な効果を示すことが証明されたが、依然として根治は不可能である。申請者らはEGFR-TKI投与後に残存する薬剤耐性クローン（DTPs；drug-tolerant persisters）ががん幹細胞と細胞老化を起こした細胞の少なくとも2種の異なる細胞群で形成されることを発見した。本研究は、①薬剤耐性の機序として重要な、非小細胞肺がんから小細胞肺がんへの形質転換におけるがん幹細胞の役割や、②がん幹細胞から小細胞肺がんへ分化する機序を解明し、治療法の開発に結びつけることを主な目的としている。本研究により形質転換が関与する薬剤耐性に関しては、薬剤耐性の克服により非小細胞肺がんの生存率が改善すること、小細胞肺がんの発症機序を解明することで、極めて予後不良な小細胞肺がんの生存率が改善することが期待される。
ALK遺伝子陽性肺がん細胞株H2228にALK-TKIとしてAlectinib（3 μM）を投与し、DTPsを作成した。DTPs中の老化細胞の確認をβガラクトシダーゼ染色にて行った。Alectinib誘導性DTPsを用いて、幹細胞の表面マーカーCD133（Cell.141:69-80,2010）にてフローサイトメトリーを行うことでCD133 high/lowの細胞グループを選別した。CD133 lowに老化細胞集団が、CD133 highグループに幹細胞が多く含まれていることを確認した。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

細胞実験が予定通りに進行している。

Strategy for Future Research Activity

計画通りに実験を行っていく。

Causes of Carryover

先行研究で残っていた抗体から使用したため。次年度に抗体試薬を購入する予定である。