2021 Fiscal Year Research-status Report
NKG2D、NKG2D ligand発現制御による円形脱毛症の新規治療の開発
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20K08668
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| Research Institution | Hamamatsu University School of Medicine |
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Principal Investigator |
伊藤 泰介 浜松医科大学, 医学部, 准教授 (90293638)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | 円形脱毛症 / NKG2D / NKG2Dリガンド / 可溶性NKG2Dリガンド / PD-1 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では様々な円形脱毛症の病期、病型における血中可溶性NKG2D ligand濃度を測定することでバイオマーカーとして利用可能かどうかを検討する。また可溶性NKG2D ligandによるNKG2D発現の制御を検討し、円形脱毛症治療への可能性を検討することである。バイオマーカーを見いだすことで治療効果の推測、予後の事前推測、難治化を検討するための指標となり得る。円形脱毛症のバイオマーカーを検討することは従来なされておらず、学術的独自性が高く、また患者の治療選択や継続の有用性を検討するにあたり、バイオマーカーを検討することは研究を患者に対して還元するにあたり極めて有用性が高いものと考えている。
円形脱毛症を発症したC3H/HeJマウスの鼠径、腋窩リンパ節よりリンパ球を採取し、30IU/ml IL-2、IL-7 (25 ng/ml)、IL-15 (50 ng/ml)、Dynabeads TActivator CD3/CD28とともに5日間培養後、8週齢の未発症マウスに皮内注射することで、円形脱毛症を誘導した(Wang et al. J Invest Dermatol 2015)。皮膚症状において浸潤するT細胞はNKG2D陽性細胞をみとめ、また病変部では毛包上皮を中心にH60(NKG2Dリガンド）発現を認めた。IL-15、IFN-gといった炎症生サイトカインの上昇も認めている。なお血清中の可溶性NKG2D ligandの検討のため血清をストックしている。マウス可溶性NKG2D ligandは、培養CD8陽性T細胞のNKG2D発現を抑制させる傾向であることが判明した。PD-1発現とNKG2D発現はともに相反する発現量である可能性が高い。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
円形脱毛症モデルマウスの確立にやや時間を要しているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
リンパ節細胞におけるIFN-γによるNKG2D発現の誘導に対するH60の影響の検討については、H60によるNKG2D発現への影響を検討するため、脾臓やリンパ節からリンパ球を採取し、100IU/ml IFN-γで24時間培養する際に、H60との共培養の有無によるNKG2D発現の強度の違いを検討する。
活性化リンパ球誘導円形脱毛症に対する可溶性H60の発症に対する影響の検討については、活性化リンパ球を皮内注射したマウスに対して、H60を同時に腹腔内もしくは静注投与することで円形脱毛症の発症率の変化を検討する。
抗NKG２D抗体による円形脱毛症の発症抑制効果については、活性化リンパ球を皮内注射したマウスに対して、定期的に抗マウスNKG2D抗体を皮内注射もしくは腹腔投与した群とPBSを投与した比較群の間において、発症率に有意な差があるかを検討する。
抗NKG2D抗体による円形脱毛症の治療効果については、活性化リンパ球皮内投与によって発症誘導したC3H/HeJマウスに対して、抗マウスNKG2D抗体を皮内投与し、病変部の改善がみられるかを検討する。同病変部から皮膚を採取し、NKG2D陽性細胞の分布、H60発現量、IFN-γやIL-15の発現量について、免疫組織科学的、mRNAレベルでの検討を行う 。
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| Causes of Carryover |
マウス購入が減ったため 余剰マウスを使用したため
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