2021 Fiscal Year Research-status Report
Improvement of IgG4-related disease model and its treatments
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20K08801
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
吉藤 元 京都大学, 医学研究科, 講師 (20422975)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | IgG4関連疾患 / 動物モデル |
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| Outline of Annual Research Achievements |
IgG4関連疾患は，全身の臓器に線維化を伴う炎症性病変をきたす疾患であり，日本の患者数は約20,000人とされる．進行すると視力障害，黄疸，腎不全，腹部大動脈瘤などをきたすことがあり問題となる．本疾患の特徴は，血清IgG4濃度上昇と，病変組織中のIgG4陽性細胞数増加である．ステロイドが有効であるが，中止困難であり副作用が問題となるため，新薬の開発による脱・ステロイドが望まれている．ヒトIgG4は，重鎖が折れ曲がっている等の特殊な構造を有するが，その機能は未解明である．マウスには同様の構造をもつサブクラスはないため，代表者らはヒトIgG4ノックインマウス（IgG4KIマウス）を作成した．本研究の目的は，IgG4の機能解明，本モデルのさらなる改良，そして，本モデルを用いた治療アプローチである．リンパ増殖性疾患の動物モデルであるMRL/lprマウスとの交配などの改良により，本モデルにおいて，血清IgG4濃度高値と，病理組織でIgG4陽性細胞の増加を認めた．MRL/lpr-IgG4KIマウスは，膵炎，胃炎などの所見がMRL/lprマウスよりも増強していたため，MRL/lpr-IgG4KIマウスの脾細胞を採取してフローサイトメトリーで解析した．結果，MRL/lpr-IgG4KIマウスの脾臓において，CD69陽性リンパ球（活性化リンパ球）の割合が増加していた．さらに，IgG4関連疾患に表現型が類似するLAT/Y136FマウスとIgG4KIマウスの交配を行った．今後，LAT/Y136F-IgG4KIマウスの各臓器の標本を作製し，IgG4KIマウスおよびLAT/Y136Fの病理組織型と比較する．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
IgG4関連疾患への新薬候補を試すプラットフォームとすることを目的とし，マウスには同様の構造をもつサブクラスはないため，ヒトIgG4KIマウスの開発を行った．リンパ増殖性疾患の動物モデルであるMRL/lprマウスとの交配などの改良により，本モデルにおいて，血清IgG4濃度高値と，病理組織でIgG4陽性細胞の増加を認めた．さらに，MRL/lprマウスに比べて，MRL/lpr-IgG4KIマウスは，膵炎，胃炎などの所見が増強していた．MRL/lpr-IgG4KIマウスで炎症所見が強くなる理由を精査するため，MRL/lpr-IgG4KIマウスの脾細胞を採取してフローサイトメトリーで解析した．結果，MRL/lpr-IgG4KIマウスの脾臓において，CD69陽性リンパ球（活性化リンパ球）の割合が増加していた．また，MRL/lpr-IgG4KIマウスにおいて，CD4陽性T細胞（CD3+B220－CD4+），CD8陽性T細胞（CD3+B220－CD8+）の割合は低下していた．その代わりに，ダブルポジティブT細胞（CD3+B220+）の割合が増加していた．ダブルポジティブ細胞は，MRL/lprマウスに特異的な細胞であり，その免疫活性化病態に関与するとされる．一方，LAT/Y136FマウスはIgG4関連疾患に表現型が類似するため（Yamada, PLoS One, 13(6):e0198417, 2018），IgG4KIマウスとLAT/Y136Fマウスの交配を計画し，進めることができた．
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| Strategy for Future Research Activity |
IgG4関連疾患に表現型が類似するLAT/Y136Fマウスは唾液腺，膵で形質細胞が著増し，マウスIgG1陽性細胞が著明に増加する（Yamada, PLoS One, 2018）．LAT/Y136FマウスがTh2優位となる点も，IgG4関連疾患の病態に近い．本年度は，IgG4KIマウスとLAT/Y136Fマウスの交配を進めた．今後は，LAT/Y136F-IgG4KIマウスの各臓器の標本を作製し，IgG4KIマウスおよびLAT/Y136Fの病理組織型と比較する．また，血中ヒトIgG4濃度を測定し，胃細胞中のTh1およびTh2細胞数の変化を免疫染色により解析する．一方，今年度，IgG4KIマウス，MRL/lpr-IgG4KIマウスについて学会で発表したところ，MRL/lpr-IgG4KIマウスにおいて発現するIgG4分子が，マウス体内のFcγ受容体に結合するかどうかが問題となった．文献上のデータ（Derebe, Immunol letter, 197:1-8, 2018）では，ヒトIgG4分子は，FcγRIに交差反応する．それを確認するため，HEK293細胞の表面ににマウスFcγ受容体およびアダプター分子を遺伝子導入により発現させ，MRL/lpr-IgG4KIマウス血清中のIgG4とin vitroで反応させる実験を計画している．
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Research Products
(1 results)
