2021 Fiscal Year Research-status Report

抗インフラマソーム能欠失型ウイルスを利用した新しいウイルス予防・治療法の研究

Research Project

Project/Area Number	20K08830
Research Institution	Aichi Medical University
Principal Investigator	小松孝行愛知医科大学, 医学部, 准教授 (20215388)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	田中幸枝福井大学, 学術研究院医学系部門, 助教 (10197486) 森田奈央子愛知医科大学, 医学部, 助教 (20815881)
Project Period (FY)	2020-04-01 – 2023-03-31
Keywords	インフラマソーム / パラミクソウイルス / アクセサリー蛋白質
Outline of Annual Research Achievements	インフラマソームは，自然免疫細胞を中心に発現する細胞質多タンパク質複合体で，感染に伴う危険シグナルに察知して活性化しIL-1βやIL-18を分泌させ抗ウイルス免疫を誘導する．そのため，ウイルスはインフラマソームの活性化を抑制する方が増殖に有利である．私達はこれまでに，インフラマソームの再構成実験を用いて，「パラミクソウイルスのアクセサリー蛋白質に，インフラマソームの活性化を抑制する能力（抗インフラマソーム能）が保存されている」ことを明らかにした．アクセサリー蛋白質を発現しない組換えウイルスは弱毒化する．そのため，アクセサリー蛋白質やそれが関わる宿主因子はワクチンや治療薬の恰好の標的となる．しかし，現在のアクセサリー蛋白質欠損パラミクソウイルスは抗インフラマソーム能以外の機能（抗インターフェロン能やウイルスの転写・複製を調節する能力）まで喪失しているため，抗インフラマソーム能の役割を解明することは難しい．本研究では，抗インフラマソーム能のみを欠失した変異アクセサリー蛋白質を作出し，パラミクソウイルスの病原性における抗インフラマソーム能の役割，抗ウイルス免疫におけるインフラマソームの重要性を明らかにすることを目的とした．これまでに点置換変異を施した変異アクセサリー蛋白質をデザインし，再構成実験を用いて，抗インフラマソーム能に加えて抗インターフェロン能，ウイルスの転写・複製調節能を評価したところ，抗インターフェロン能，転写・複製調節能に影響はなく，抗インフラマソーム能のみを欠失した変異アクセサリー蛋白質を複数分離できた．
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 3: Progress in research has been slightly delayed. Reason 2021年度は，2020年度にデザインしたパラミクソウイルスの変異アクセサリー蛋白質の性能を引き続き評価したところ，目的の変異アクセサリー蛋白質を複数分離できた．現在，これらの変異アクセサリー蛋白質をそれぞれ発現する組換えパラミクソウイルスを作製中である．
Strategy for Future Research Activity	2022年度は，抗インフラマソーム能のみを欠失した変異アクセサリー蛋白質を発現する組み換えパラミクソウイルスを作製し，抗インフラマソーム能の病原性における役割を解析していく予定である．
Causes of Carryover	当初の研究計画より，多くの変異アクセサリー蛋白質が分離されたので，複数の組換えウイルスを作製するための合成遺伝子費用が必要となった．