2021 Fiscal Year Research-status Report
エストロゲン制御機構とその逸脱に関わる標的分子による女性がん増悪機構の解明と応用
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20K08916
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| Research Institution | Saitama Medical University |
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Principal Investigator |
佐藤 航 埼玉医科大学, 医学部, 助手 (10772783)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
池田 和博 埼玉医科大学, 医学部, 准教授 (30343461)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | ステロイドホルモン / 遺伝子発現 / 乳がん / 子宮体がん |
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| Outline of Annual Research Achievements |
エストロゲンは乳がん、子宮体がんなどの女性がんの増殖・進行と深い関係を有しており、これらのがんの多くはエストロゲン受容体(ER:estrogen receptor)を発現している。乳がんではホルモン療法が奏功するものの、治療中に抵抗性を獲得するものが多く、問題となっている。また、子宮体がんについてはホルモン療法の効果は限定的である。これらのことからエストロゲン制御とその逸脱機構の解明は、女性がんの診断・治療へ繋がると期待される。申請者らが独自に単離したエストロゲン応答遺伝子Efpはエストロゲン応答性の乳がん、子宮体がんに加えて、ホルモン抵抗性を獲得したがん細胞においても発現しているが、その役割は明らかではない。最近、EfpはER陽性/陰性に関わらず乳がんの転移に関わる遺伝子発現のヒエラルキーにおいて最も上位のマスター遺伝子となることが報告され、さらに、EfpはRNA結合タンパク質として機能することも示されている。本研究は、これらのこれまでにない視点での女性がんにおけるEfpの役割の解明を目指す。また、患者由来がん細胞と異種移植を活用した臨床により近いモデルの構築を行い、エストロゲン制御機構からの逸脱とホルモン療法抵抗性のメカニズムの解明とその克服法の開発を目指す。本年度は乳がん培養細胞において、Efpの発現低下系とベクターによる過剰発現系を構築し、細胞増殖、細胞周期、移動能などにおける役割を検討した。また、乳がん細胞などにおいてEfpのsiRNAによる発現低下系を構築し、遺伝子発現プロファイルに対する影響を解析した。これらの解析により、Efpによって制御される標的シグナル経路の探索を進めた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
女性がん由来の培養細胞株を用いて、エストロゲン応答遺伝子Efpの発現をsiRNAにより発現低下する系ならびにベクターにより過剰発現する系を構築し、細胞増殖、細胞周期、移動能、エストロゲン応答性、ホルモン治療薬に対する反応性を解析している。また、Efpを標的とするsiRNAを用いた発現低下系の解析を行い、標的シグナル経路の探索を行った。さらに、Efpの新しい作用メカニズムを明らかにするため、Efp抗体を用いてEfpと結合する因子の探索を進めており、条件検討を行っている。また、女性がんの患者由来組織を用いて三次元スフェロイド培養を行い、患者由来がん細胞(patient-derived cancer cell, PDC)の作製を進めている。これらにより、本研究はおおむね順調に進んでいる。
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| Strategy for Future Research Activity |
細胞株や患者由来がん細胞を用いて遺伝子発現解析を行い、Efp遺伝子に制御される遺伝子の絞り込みを進める。候補となる遺伝子については、siRNAを用いた発現低下系ならびにベクターによる過剰発現系を構築し、候補遺伝子の役割を明らかにする。また、Efpタンパク質と結合する候補因子を同定し、Efpにより発現調節を受けるメカニズムを解析する。候補遺伝子については、女性がんの臨床サンプルにおける発現を解析し、病理学的因子や患者予後との相関、診断学的価値の解析を進める。
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| Causes of Carryover |
患者由来がん組織からの三次元スフェロイド培養法の条件検討が順調に進み、当初予定した培地試薬関連の使用量が抑えられた。次年度は患者検体数を追加して、患者サンプルからの三次元スフェロイド培養と解析を施行する。
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