2021 Fiscal Year Research-status Report
ステロイド産生細胞における環状構造RNAの意義の解明
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20K08922
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| Research Institution | Fukuoka University |
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Principal Investigator |
田中 智子 福岡大学, 医学部, 講師 (10380528)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大江 賢治 福岡大学, 薬学部, 教授 (30419527)
田邉 真紀人 福岡大学, 医学部, 准教授 (60707305)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | 副腎腫瘍 / 環状RNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
環状構造のRNAは組織特異的、発生段階特異的に発現している。環状RNAは、マイクロRNAをスポンジのように吸着して遺伝子発現を調節したり、自身が翻訳されて、発生、がん、免疫などの幅広い生命現象に関わっている。また、環状RNAは構造的に安定であるため、新規バイオマーカーとしても注目されている。副腎では約2000種類の環状RNAが発現するといった報告があるものの、機能は不明である。本研究では、ステロイド産生細胞の増殖調節、および、ステロイド産生調節における機能性環状RNAの意義解明を目標に研究を行っている。これまでに、ステロイドホルモン産生における主要な調節因子NR5A1（別名Ad4BP/SF-1）の mRNAスプライシングを研究する過程において、副腎癌細胞株では検出されないが、正常副腎皮質にのみ存在する環状構造のNR5A1 RNAを発見した。その形成には小胞体ストレス応答経路のInositol-requiring protein-1 (IRE1) が深く関与していたため、circIRE type RNAと命名した。
正常細胞における小胞体ストレスを介した環状RNAの形成は、癌化や過剰ステロイド産生に対して抑制的に作用するのではないかと考えられる。現在、１）正常副腎組織と副腎腫瘍とで、環状RNAの発現にどのような違いがあるか網羅的に解析し、発現阻害実験等による環状RNAの機能解析を行う。２）小胞体ストレス誘導性の環状RNAがどのように作られ、その破綻によってステロイド産生の異常や増殖亢進がおきるのかについて解析中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
現在、正常副腎組織と副腎腫瘍とで、環状RNAの発現にどのような違いがあるか網羅的に解析し、発現阻害実験等による環状RNAの機能解析を行っている。比較的長い環状RNAを検出するため、ロングリードシークエンスを行う準備を進めてきた。臨床検体の解析を行う前に、ヒト副腎皮質癌細胞株と正常ヒト副腎皮質細胞を用いて予備検討中である。
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| Strategy for Future Research Activity |
臨床検体の解析を行う前に、ヒト副腎皮質癌細胞株と正常ヒト副腎皮質細胞を用いて予備検討を行ったのちに、副腎腫瘍検体と正常副腎より、total RNA抽出し直鎖RNAをRNaseRにて分解させた後に、ライブラリー調整を行い、ロングリード解析のため、ナノポアを用いてRNAシークエンスを行う。
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| Causes of Carryover |
当該年度の予算のほとんどを使用したが、納期未定の試薬などは代替品を使用したために、若干の残金が生じており、これらの残金は次年度の消耗品（試薬など）の購入に使用する予定である。
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