2020 Fiscal Year Research-status Report
Analysis of role of exosome in septic peritonitis and its clinial apllication
| Project/Area Number |
20K09052
|
|---|
| Research Institution | University of Yamanashi |
|---|
Principal Investigator |
河野 寛 山梨大学, 大学院総合研究部, 准教授 (40322127)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
細村 直弘 山梨大学, 大学院総合研究部, 助教 (60402070)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
|
| Keywords | マクロファージ / 細菌性腹膜炎 / サイトカイン / エクソゾーム |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
【方法】ラット穿孔性腹膜炎モデル（cecal ligation and puncture model: CLP ）作成12時間後に採取した血液よりexosome（Exo）を遠心法により分離し、正常ラットに尾静脈より静注した。投与後24時間での肺の病理組織変化、肺に浸潤する好中球数を検討した。さらに、Toll like受容体4（TLR4）拮抗剤と、肝マクロファージ（KC）除去目的のためのリポソーム封入クロドロネート（liposome-encapsulated clodronate）を投与した動物にExoを静注したCLPモデルにおいても検討した。正常ラットより肝マクロファージ（Mf）と肺間質Mfを分離し、Exo刺激による肝Mfと肺Mfの活性化をTNF-alpha産生より評価検討した。また、TLR4受容体拮抗剤を共培養した系においても臓器Mfの活性化を検討した。
【成績】CLPモデル作成後、すべての動物が生存した。CLPモデルラット由来Exoの正常ラットへの投与は、肺の炎症細胞浸潤と急性肺障害を誘発した。これらの変化はTLR4受容体拮抗剤と肝マクロファージの除去により改善した。肝Mfならびに肺MfはExo刺激によりTNF-alpha産生が増加し、この活性化は肝Mfで特に増強した。また、MfのTNF-alpha産生はTLR4受容体拮抗剤により有意に低下した。
【結論】穿孔性細菌性腹膜炎において、血中Exoは急性肺障害を惹起することが明らかとなり、その機序の1つとしてExo刺激によるTLR4を介した臓器Mfとくに肝Mfの活性化の関与が考えられた。細菌性腹膜炎における肝臓と肺の臓器相関が示唆された。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
令和2年度に予定していた検討項目は、90％終了できた。エクソゾームの分画に関する関与の検討が間で途中の段階である。
|
| Strategy for Future Research Activity |
令和2年度に予定していて、行いなかった検討項目を終了させるとともに、令和3年度から4年度にかけて予定している検討項目を順次進めていく。エクソゾームの分画によるマクロファージ活性化の解析と、その機序を確認していく。
|
| Causes of Carryover |
検討項目を全て施行出来ず、次年度への繰り越しとなった。エクソゾームの分画に関する関与とその機序に関する検討を現在行っている段階であるため。
|
Research Products
(1 results)
