2020 Fiscal Year Research-status Report

転写因子BHLHE41/DEC2の発現制御機構の多角的解析と肺癌における臨床意義

Research Project

Project/Area Number	20K09181
Research Institution	Shizuoka Cancer Center Research Institute
Principal Investigator	永田俊行静岡県立静岡がんセンター(研究所), その他部局等, 研究員 (70611763)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	佐藤雅美鹿児島大学, 医歯学域医学系, 教授 (30250830) 上田和弘鹿児島大学, 医歯学総合研究科, 特任准教授 (90420520) 狩集弘太鹿児島大学, 医歯学域鹿児島大学病院, 助教 (20648050) 横枕直哉鹿児島大学, 医歯学総合研究科, 特任助教 (00418857) 前田光喜鹿児島大学, 鹿児島大学病院, 医員 (70795674) [Withdrawn] 武田亜矢鹿児島大学, 医歯学総合研究科, 特任助教 (80794700) 梅原正鹿児島大学, 医歯学域鹿児島大学病院, 助教 (20837794)
Project Period (FY)	2020-04-01 – 2023-03-31
Keywords	BHLHE41/DEC2 / BHLHE41/DEC2発現制御機構 / 非小細胞肺癌
Outline of Annual Research Achievements	BHLHE41/DEC2の発現制御機構の解明に関して、①BHLHE41/DEC2の高発現している正常扁平上皮細胞株HaCatにおいてプロモーター活性部位を概ね絞り込むことができた。その部位に結合する転写因子候補を絞り込むのには時間を要しており、その後の細胞株を用いた解析への移行を目指している段階である。②DNAメチル化による発現制御解析のため、細胞株においてバイサルファイトシーケンシング法でBHLHE41/DEC2プロモーター領域のメチル化部位をある程度絞り込むことができた。③microRNAによる発現制御の解析に関しては、臨床検体（非小細胞肺癌摘出検体の癌部と非癌部）から試料を採取することができ、microRNA解析に備えている。④BHLHE41/DEC2蛋白質の安定化制御機構を解析に関しては、今年度の進捗はなかった。 BHLHE41/DEC2発現低下によるgemcitabine耐性機構の解析に関して、親株とBHLHE41/DEC2強制発現細胞株の種類を増やすことを行っており、cDNAマイクロアレイ解析に備えるている。 BHLHE41/DEC2免疫染色の実臨床への応用に関しては、肺癌手術症例の免疫染色の症例数を順調に増やすことができ、特に術前CT画像で上皮内癌か微小浸潤癌が疑われる症例を蓄積することができている。本年度は各解析において準備段階であり、解析のための材料は整いつつある状況である。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 3: Progress in research has been slightly delayed. Reason 研究環境が変化したため、研究を行うためのhard面の準備に時間を要した。また、共同研究者とのコミュニケーションも今までのように十分に取れなくなったことも進捗状況がやや遅れている原因の一つである。
Strategy for Future Research Activity	共同研究者と密にコミュニケーションが取れるように、Zoomを用いたweb会議を定期的に行うこととした。 BHLHE41/DEC2の免疫染色の実臨床への応用に関して、機材（Histo-Tek R-IHCラピート）の確保に難渋しており、免疫染色の迅速診断研究が行えないでいる。通常の免疫染色の症例数を増やすことで、実臨床への応用に備える。
Causes of Carryover	研究環境の変化と社会情勢により、研究に遅延が生じたたことが理由である。次年度使用額が生じた分は、本年度の成果を発表すること使用する予定である。