Development of novel therapeutic method for unstable carotid plaque focusing on neutrophil extracellular traps

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K09342
• Research Institution: University of Toyama
• Principal Investigator: 柏崎 大奈 富山大学, 学術研究部医学系, 助教 (50374484)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 黒田 敏 富山大学, 学術研究部医学系, 教授 (10301904) ; 桑山 直也 富山大学, 学術研究部医学系, 准教授 (30178157) [Withdrawn] ; 秋岡 直樹 富山大学, 学術研究部医学系, 講師 (70422631)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: Carotid plaque / 好中球細胞外トラップ / unstable plaque

Outline of Annual Research Achievements

研究者らは、動脈硬化性の内頚動脈狭窄症の不安定化に対する創薬としてNeutrophil Extracellular Trapsに着目をした。内頚動脈狭窄症は不安定プラークと呼ばれる、脳梗塞発症high riskなプラークが存在する。このプラークでは、マクロファージが中心となった慢性炎症が発生していることが知られている。本来、マクロファージは1カ月程度の寿命とされ、局所に集簇したものは1カ月以上はマクロファージとして働くことができないはずであるが、慢性炎症は1カ月以上継続することが知られている。研究者らは、慢性炎症が継続する原因としてNeutrophil Extracellular Trapsがプラーク内で大きく関与していると仮説を立て、実験を開始している。まずは、ヒトの頚動脈プラークを用いた研究を開始している。研究者らは、内頚動脈狭窄症に対するCEA検体を用いて、不安定プラークならびに安定プラークに対して免疫染色を実施した。検体数は69例であり、このうち安定プラークが15例、不安定プラークが54例であった。
CD66bの染色を完了した。これらの検体をH3Cit, NE, myeloperoxidase (MPO) and a DNＡ(DAPI)で複合染色をおこないNeutrophil Extracellular Trapsの染色をおこなった。現在は、プレパラート上のNeutrophil Extracellular Trapsの定量を実施しているところである。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

当初の予定通り、ヒトの頚動脈プラークを用いた研究を開始し、免疫染色を実施している。

Strategy for Future Research Activity

今後は、NETsにより捉えられた複合体（Netosis）がどのようにして、除去されていくかを検討する。まず、”Don’t eat me” signalが出現しているかどうかを実験を進めていく。

Causes of Carryover

学会出張等がリモート参加となり、旅費が支出されなかった。また、調達方法の工夫などにより、経費の節約ができたため。
次年度の試薬等に使用する。