網羅的メチル化解析で同定された頭蓋内高悪性度胚細胞腫治療標的候補分子群の機能解析

2023 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 20K09380
• Research Institution: National Defense Medical College
• Principal Investigator: 富山 新太 防衛医科大学校(医学教育部医学科進学課程及び専門課程、動物実験施設、共同利用研究施設、病院並びに防衛, 病院 脳神経外科, 講師 (40385810)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 里見 介史 杏林大学, 医学部, 講師 (10633977) ; 市村 幸一 杏林大学, 医学部, 特任教授 (40231146)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 頭蓋内胚細胞腫瘍 / 非ジャーミノーマ性胚細胞腫瘍 / マイクロRNA / 新規分子治療標的開発

Outline of Annual Research Achievements

頭蓋内胚細胞腫瘍（iGCT）は稀ではあるものの特に本邦で多く発症する頭蓋内悪性腫瘍群であるが、その中でも高悪性度群である非ジャーミノーマ胚細胞腫 （NGGCT）に対する有効な治療法は未だ存在しない。そこで我々が設立したiCGT consortiumに集められたiCGTサンプル群に対しメチル化アレイによる網羅的解析を行った結果、iGCTのなかでも特にNGGCT群で特異的に機能している可能性のあるmiR群を同定し得た。そこで今回はそれらの機能解析を行うことにより最終的にNGGCTに対する新規分子治療標的の開発を目指した。網羅的メチル化解析の結果得られた３つのmiRの２つのヒト非ジャーミノーマ胚細胞腫（NGGCT）培養細部株における機能解析を行い、これらの３つの miRはNGGCTの腫瘍特性を制御している可能性が示唆された。 そこでこれらのmiR群を発現させた２つのNGGCT細胞株を用いて網羅的解析によるNGGCTの治療標的分子シグナル/分子と新規治療標的薬剤の同定を行ったところ、幾つかのミトコンドリア依存的細胞死の制御に関わる分子を標的とした候補薬剤の新規治療薬としての可能性が示唆された。それらの薬剤の治療効果判定をin vitroで行ったところ、幾つかのＮＧＧＣＴ培養細胞株で単剤の処理（0.1～10μM濃度下で）のみで濃度依存的に細胞死が誘導されることを確認したため、更にin vivo治療モデルでの治療効果の検証に移行した。
今季では、この治療モデルを完遂すべく実験を行った、候補薬剤はいずれもヌードマウスを用いた頭蓋内腫瘍細胞移植モデルマウスに対し腹腔内投与もしくは静脈内投与ににて全身投与が行われが、恐らくは血液脳関門の問題によりこれらの薬剤は有効腫瘍組織内濃度に到達する前にモデルマウスに対し致死量となってしまい明らかな治療効果を証明することが出来なかったため、実験終了とした。

Research Products

• [Presentation] GENOME-WIDE ASSOCIATION STUDY OF INTRACRANIAL GERM CELL TUMORS: A COMMON DELETION AT BAK1 ATTENUATES THE ENHANCER ACTIVITY AND CONFERS RISK FOR THE BRAIN TUMORS IN CHILDREN ADOLESCENTS AND YOUNG ADULTS (2023)
  • Author(s): Keita Terashima, Kyuto Sonehara, Yui Kimura, Yoshiko Nakano, Tatsuya Ozawa, Meiko Takahashi, Kenji Suzuki, Takashi Fujii, Yuko Matshita, Arata Tomiyama, et. al.
  • Organizer: Pediatric Neuro-Oncology Research Conference
  • Int'l Joint Research