2021 Fiscal Year Research-status Report
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20K09628
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| Research Institution | International University of Health and Welfare |
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Principal Investigator |
井原 基公 国際医療福祉大学, 大学病院, 講師 (50403506)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
河村 和弘 国際医療福祉大学, 医学部, 教授 (10344756)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | IVA / 卵巣移植 / 卵胞 / 組織培養 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
卵胞の成熟障害は早発閉経や高齢不妊患者、抗癌剤を使用した若年癌患者などの卵巣機能不全患者において治療困難な病因であり、それらの大半は原因不明である。我々のグループは新規治療法として卵胞活性化療法（IVA: in vitro activation）を開発したが、質の良い卵母細胞をより効率的に獲得するためには未だ改善の余地がある。卵胞の発育率を改善させるために世界においてもさまざまな方法が報告されているが、いずれも成熟卵胞の獲得率は低いままである。そこでIVA療法に改良方法を取り入れ、より優れた卵胞発育障害の治療法を開発し、卵巣機能不全患者から質の高い卵母細胞を獲得することを目的とした基礎研究を行った。
PI3KシグナルやHippoシグナル以外でも、VEGFやHIF-1αなどの血管新生因子も卵胞発育を制御している。IVAでは卵巣皮質組織切片を再度患者の卵巣や卵管の漿膜下に移植し直すため、その体内培養過程で移植卵巣組織をより効率的に生着させる必要がある。卵巣組織移植時に血管新生因子を試薬として使用しても、それらの半減期はほとんどが数時間であるため、活性をもつ試薬は組織長期培養中に分解されるため、作用持続効果は乏しい。そのため、薬物徐放システムを採用し、活性のある血管新生因子が長期（数日間）にわたって移植組織で機能できる環境の構築を試みた。
2000年度は共同研究者と交渉し、VEGF徐放粒子を作成してもらった。VEGFを用いた薬物徐放システムの有効性を評価するため、予備実験でVEGF徐放粒子をマウス卵巣組織切片と一緒に移植培養し、腹部の筋膜と腹膜間が評価しやすい移植場所であることを見出した。今年度はその結果を踏まえ、HE染色で移植効率の確認を行った。また、卵巣を移植する際に移植片の血流状態で移植効率が変わることを見出した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
上司の異動に伴い、研究室自体の引っ越しによる実験停止が数ヶ月に及んでおり、未だ研究環境を整えられていないが、2021年度で移植テクニックが安定した。
2000年度はVEGFを含有しない徐放剤だけをコントロールとして使用していたが、2021年度はVEGF徐放剤を含まない通常のVEGFを用いた移植と比較して、VEGF徐放シートを併用して卵巣組織切片を移植した場合では卵巣組織が壊死せずに残存している割合が高かった。卵巣組織を移植する際に血流をできるだけ保つため、移植テクニックとして縫合は最低限にすること、徐放剤シートの設置場所自体も場合によっては血流の妨げになることが判明した。
分子生物学的な客観的データでの研究成果はまだ出せていないが、ポジティブな実験システムが構築できたため、本研究課題の進捗状況は順調である。
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| Strategy for Future Research Activity |
これまでの実験結果から卵巣移植においてVEGF徐放システムが機能していることが示されたので、その有効性をHE染色だけでなく、VEGF下流の遺伝子発現レベルや生着した残存卵胞の評価をすることで客観的データを作成する。この徐放システムは、当初の予定していた間葉系幹細胞を用いたMSC療法や、不妊患者の末梢血液から採取した血漿を用いたPRP療法よりもはるかに簡便で効率的に移植組織を生着させることができそうなので、もともと予定していた①卵巣皮質培養条件の比較検討と②卵巣皮質生着率改善効果と卵胞獲得率の比較検討はクリアできる見込みであり、2000年度同様、このまま現在の実験を継続・展開していく。
また、③成熟卵母細胞獲得率、受精成功率の比較検討についても、移植した卵巣組織から卵子を採取することで課題をクリアすることができると考える。
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| Causes of Carryover |
上司の異動に伴い、研究室自体の移転があり、研究自体が２月以降実質止まっている。現時点でも研究室の準備中で研究室稼働の目途がついていないため、試薬などの購入はしていない。
研究できる目途がつき次第適宜試薬の購入をしていく。
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