子宮頸癌におけるWEE1阻害薬の検討およびその免疫環境の評価

2022 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 20K09678
• Research Institution: Nihon University
• Principal Investigator: 池田 悠至 日本大学, 医学部, 准教授 (80713453)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 清谷 一馬 公益財団法人がん研究会, がんプレシジョン医療研究センター 免疫ゲノム医療開発プロジェクト, 主任研究員 (30433642)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 子宮頸癌 WEE1阻害薬

Outline of Annual Research Achievements

子宮頸癌細胞株で陰性コントロールとして、前立腺細胞株であるLNCaP (HPV なし, P５３変異なし)を用いてWee１阻害薬であるAZD１７７５、およびシスプラチンの効果を評価した結果、AZD１７７５のIC５０が最も低いのはSiHa細胞であり、シスプラチン併用時のIC５０のCombination indexは0.771であった。
同条件下でのWesternblotにより、Wee１、TP５３、pCDC２,CDC,γH２AX ,pHH３について評価を行い、Wee１阻害薬使用時にはSiHa細胞株においてTP５３の発現が増強しCDCおよびpCDC２の発現は低下、γH２AXおよびpHH３は発現が増強していた。
またCisplatin併用時にはγH２AXは発現がWee1単独時と比し強かったが、pHH３においてはWee１単独時に比し低かった
。Negative controlとして 使用した前立腺がん細胞株であるLNCaPではpHH３の発現はSiHaに比し低かった。またFlow cytometryによりSubG0/G１の割合を調べた所、SiHa細胞株においてはその両者ともWee１阻害薬およびWee１阻害薬とCisplatinの併用時に著明に上昇していたが、LNCap細胞株においてはほぼ認めなかった。
Colony formation assayによる評価では、Control、およびCisplatin単剤と比しWee1阻害薬はColony形成が有意に少なく、Wee1阻害薬にCisplatinを追加した場合はほぼColony形成を認めなかった。
以上より、子宮頸癌細胞株に対するWee１阻害薬、およびそのCisplatinとの併用効果が確認された。