角膜上皮治癒後の実質構造の再構築過程でのムチンの機能解析に基づいた新規治療戦略

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K09796
• Research Institution: Wakayama Medical University
• Principal Investigator: 白井 久美 和歌山県立医科大学, 医学部, 准教授 (70326370)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 雑賀 司珠也 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (40254544) ; 岡田 由香 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (50264891)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: ムチン / 角膜

Outline of Annual Research Achievements

角膜上皮創傷治癒過程での角膜内知覚神経再生におけるドライアイやMuc16の影響について検討した。
眼窩外涙腺の外科的摘出マウスをマウスドライアイモデルとする。①野生型マウスー未処置群、②野生型マウスードライアイモデル作成群、③Muc16ノックアウトマウスー未処置群 、④Muc16ノックアウトマウスードライアイモデル作成群の４群を対象とする。４群とも右眼を対象とした。①～④の４群のマウスに、全身麻酔下で、右眼にトレパンで直径２mmの円形を角膜上皮にマーキングし、スパーテルを用いてその部の角膜上皮を掻爬して、直径２mmの円形の角膜上皮欠損を作成した。角膜上皮欠損作成の12時間後、24時間後、36時間後にマウスを屠殺、右眼の眼球を摘出した。角膜輪部よりやや後方で全周切開し、角膜片を採取した後、角膜周辺部から切開を入れて、角膜のフラットマウント標本を作成した。抗TuJ1抗体を用いてTuJ1の局在を蛍光免疫組織学的手法で調べることにより、三叉神経の角膜内での再生について検討し、①～④の４群で比較した。
４群とも直径２mmの角膜上皮欠損は24時間で再被覆し角膜上皮の被覆時間に差はなかった。蛍光免疫組織学的手法によるTuJ1の局在の評価では、36時間後にTuJ1は角膜の中央まで伸展しており、４群で差はなかった。Muc16ノックアウトマウスードライアイモデルでやや密度が少ないが、有意なレベルではなかった。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

ノックアウトマウスの繁殖状況により使用可能な匹数が限定される

Strategy for Future Research Activity

角膜上皮創傷治癒過程での角膜新生血管や角膜リンパ管新生の動向について検討する。
Stat3阻害薬、デキサメサゾン、IL-6抗体局所投与のMuc16欠損マウスでの病態の治療効果について検討する。