2020 Fiscal Year Research-status Report
The roles of macrophages in the process of wound healing
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20K09872
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| Research Institution | Teikyo University |
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Principal Investigator |
菅 浩隆 帝京大学, 医学部, 教授 (60633972)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | 創傷治癒 / マクロファージ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
研究内容については関連施設における倫理委員会の承認を得た。ヒトの創傷部位から肉芽組織を採取し，存在する細胞をフローサイトメトリーで解析する手法を確立した。肉芽組織をハサミで細切し，コラゲナーゼ処理を行った。結合組織をフィルターで濾過した後，遠心処理を行うことにより細胞成分のみを回収した。抗体反応の後，フローサイトメトリーでの解析を行った。まずはCD４５陽性の免疫系細胞とCD４５陰性の非免疫系細胞（線維芽細胞，血管内皮細胞など）に大きく分類した。CD４５で標識された免疫系細胞は，さらに顆粒球，リンパ球，単球・マクロファージ系細胞の３群に分類可能であった。顆粒球はCD１１ｂ陽性/CD１５陽性の細胞，単球・マクロファージ系細胞はCD１１ｂ陽性/CD１４陽性の細胞として同定された。リンパ球はさらに表面マーカーによる細分が可能であり，CD４陽性のヘルパーT細胞，CD８陽性の細胞傷害性T細胞，CD１９陽性のB細胞に分類可能であった。末梢血におけるそれぞれの細胞の存在割合と比較して，肉芽組織においては単球・マクロファージ系細胞の存在割合が高いことが示唆された。また，単球・マクロファージ系細胞の一部は，M２タイプのマクロファージの指標であるCD２０６を発現していることも確認できた。検体による存在割合のばらつきはあるものの，解析手法としては安定した結果が得られるレベルにまで達していると考えられた。今後はさらに検体数を増やしてく予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
フローサイトメトリーで解析した検体の数が少なく，統計的な有意差などはまだ得られていない。また，肉芽組織中のマクロファージを同定することは可能となったが，まだソーティングして回収するレベルにまでは達していない。
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| Strategy for Future Research Activity |
解析する検体の数を増やして統計的な有意差のあるデータを取得する。また，肉芽組織中のマクロファージをソーティングして回収する手法を確立し，マクロファージの機能解析などの実験へとつなげる予定である。
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| Causes of Carryover |
解析した検体数が予定より少なく，必要な物品が少なく済んだため。今後は検体数を増やして研究を進めていく予定である。
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