The roles of macrophages in the process of wound healing

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K09872
• Research Institution: Teikyo University
• Principal Investigator: 菅 浩隆 帝京大学, 医学部, 教授 (60633972)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 創傷治癒 / マクロファージ

Outline of Annual Research Achievements

前年度に確立した，ヒトの肉芽組織に存在する免疫系細胞のフローサイトメトリーによる解析を，検体数を増やして施行した。まずはCD45陽性の免疫系細胞とCD45陰性の非免疫系細胞（線維芽細胞，血管内皮細胞など）に大きく分類した。CD45で標識された免疫系細胞は，さらに顆粒球，リンパ球，単球・マクロファージ系細胞の３群に分類可能であった。顆粒球はCD11b陽性/CD15陽性の細胞，単球・マクロファージ系細胞はCD11b陽性/CD14陽性の細胞として同定された。リンパ球はさらに表面マーカーによる細分が可能であり，CD4陽性のヘルパーT細胞，CD8陽性の細胞傷害性T細胞，CD19陽性のB細胞に分類可能であった。末梢血における存在割合（7.1%）と比較して，肉芽組織においては単球・マクロファージ系細胞の存在割合（18.1%）が高いことが示唆された（P=0.05）。また，単球・マクロファージ系細胞の一部は，肉芽組織においてはM2タイプのマクロファージの指標であるCD206を発現していることも確認できた。マクロファージが分泌するサイトカインについても解析を行った。末梢血から採取，培養したマクロファージの培養上清をサイトカインアレイにより解析したところ，IL-6, IL-8, MCP-1, CXCL-1, TIMP-1, TIMP-2, ENA-78, RANTESなどのさまざまなサイトカインを分泌していることが判明した。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

検体数が少なく，統計的な有意差が得られるまでのデータ数に届いていない。また，当初予定していたマクロファージの回収（ソーティング）に難航している。

Strategy for Future Research Activity

検体数を増やすとともに，マクロファージの回収（ソーティング）の手法を確立させたい。

Causes of Carryover

実験に使用した検体数が少なく，試薬の購入が少なく済んだため。今後は検体数を増やして研究を進める予定である。