2023 Fiscal Year Annual Research Report
Development of gene therapy for PTEN abnormal Cowden syndrome using serum-free iPS cells
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20K10117
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
神田 拓 広島大学, 医系科学研究科(歯), 専門研究員 (00423369)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山崎 佐知子 広島大学, 病院(歯), 病院助教 (00632001)
大林 史誠 広島大学, 病院(歯), 歯科診療医 (20806096)
濱田 充子 広島大学, 病院(歯), 助教 (30760318)
岡本 哲治 東亜大学, その他の研究科, 教授 (00169153)
柳本 惣市 広島大学, 医系科学研究科(歯), 教授 (10315260)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| Keywords | cowden症候群 / iPS細胞 / がん抑制遺伝子 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
全身諸臓器の多発性過誤腫と高率に悪性腫瘍を合併する疾患であるCowden(カウデン)症候群の原因遺伝子はがん抑制遺伝子PTEN(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10)であると報告されている。本研究では本学倫理規定(第ヒ-72号研究課題名:口腔顎顔面領域に病変を有する遺伝子疾患患 者の遺伝子変異およびその遺伝子診断に関する研究)に基づき同意を得られたCowden症候群患者末梢血リンパ球(CS-PBMC)を採取し、PTEN遺伝子の新規変異を検索した。その結果PTEN遺伝子のヘテロ変異を認め,Codon 341 PhenylalanineのLeucineへ置換,codon 343 Valineのstop codonへの置換を確認した。同変異によりPTEN蛋白はcodon342以降のC-末端側が欠損していると考えられた。次に無血清培地hESF9にてヒトES細胞の継代 培養，ヒトiPS細胞における未分化性と多分化能を維持可能な無血清培養系にてセンダイウイルスベクターによるCowden疾患特異性iPS細胞誘導を樹立した。次世代シーケンサーにより，PTENのエクソン8における新規生殖細胞変異(c.1020delTおよびc.1026G > A)を検出した.サンガーシークエンスにより、変異型アレルからのPTEN転写物は確認されなかった。CS特異的人工多能性幹細胞（CS-iPSC）が、フィーダー・無血清培養下で患者のPBMCから樹立された。健康なPBMCやiPS細胞と比較して、CS由来のPBMCとCS-iPSCはいずれもPTEN転写産物の発現が有意に低下していた。転写バリアントであるPTENδはCS-iPSCで増加しており、これが疾患の原因である可能性が示唆され,論文投稿を行なった。健康なPBMCおよびiPSCと比較して、CS由来PBMCおよびCS-iPSCはいずれもPTEN転写産物の発現が有意に低下していた。健常人由来のサンプルと比較すると、各種分化能や未分化性に関する性状は大きな差は認められなかった。マウス皮下に細胞注入し形成したテラトーマの解析を行ったが、Vivoでも差を認めなかった。
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Research Products
(10 results)
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[Presentation] 県立広島病院における食事による誤嚥・窒息に対する摂食嚥下サポートチームの取り組み2024
Author(s)
松井 健作, 下村 清夏, 大原かおり, 近藤 泰子, 寿賀野太志,大町 香衣, 濱田 春菜,佐々木絵理,川井千恵子,品川 恭子,中村 裕美, 江原 寛高, 熊谷 明子, 岸田 祐輝, 岩見 裕信, 五月女有華, 世良 武大, 阿部 貴文, 神田 拓, 益田 慎
Organizer
第47回日本嚥下医学会総会ならびに学術講演会
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[Presentation] 薬剤関連顎骨壊死（MRONJ）の画像分類に関する多機関共同観察研究2023
Author(s)
大鶴 光信,坂本由紀,上田順宏, 近藤英司,兒島由佳,山村佳子,六反田賢,岩田英治,上田 眞道,中原寛和,長谷川巧実,山崎佐知子,明見能成,小林雅史,佐渡友浩,神田 拓,伊藤 翼,石橋謙一郎,五月女さき子,鳴瀬智史,梅田正博
Organizer
第68回日本口腔外科学会総会・学術大会
