2021 Fiscal Year Research-status Report
歯周病原細菌の発現遺伝子をベースとした歯周病診断マーカーの検索と確立
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20K10277
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Research Institution | Nihon University |
Principal Investigator |
桑原 紀子 (篠崎紀子) 日本大学, 松戸歯学部, 講師 (90287665)
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Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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Keywords | 歯周病原細菌 |
Outline of Annual Research Achievements |
歯周病は口腔内常在細菌の微生物因子と,生体の健康状態や性状が左右する宿主因子および生活習慣などが関連する環境因子が複雑に絡みあって発症する感染症である。罹患者数が世界でも多く、日本においても国民病の一つであると考えられている。 歯周病は口腔のみならず糖尿病、動脈硬化、脳疾患など全身疾患にも影響を及ぼしていることが近年認識されている。口腔の健康を維持することは全身への歯周病の進行度を早期に,迅速かつ適正に診断し,予防・治療方針を決定することで,歯を保存することに限らず,歯周病と関連する全身疾患の予防と,病態の改善へと波及していくと考えられる。本研究では,歯周病原細菌の遺伝子発現を基盤とした歯周病の迅速診断システムの開発を目的として,ここでは主要な歯周病原細菌の発現遺伝子と歯周疾患の病態との相関性良く示す遺伝子の網羅的解析を行い、その遺伝子を基盤としたバイオマーカーを検索することにしている。令和3年度は令和2年度引き続き講座保存の歯周病原細菌株を培養し、歯周ポケット内で起こると想定した刺激を与えたのち、時間ごとに菌体を回収して全RNAを精製した。その後,rRNAを除去したmRNAリッチなRNAをサンプルとしてマイクロアレイの実験を実施した。その後、蛍光ラベルを行いアレイ実験を実施した。現在、数値化されたデータを基に著しく発現量が変化する遺伝子について解析ソフトを使用してリスト化している。また順次、リアルタイムPCRを実施しているところである。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
令和3年度は2年度に引き続き、歯周病原細菌に与える刺激の条件を再設定、確定できたが、予定していた3つの条件のうち、アレイ実験および解析が2つしか実施できなかったため実験計画の進捗は予定よりやや遅れが生じている。
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Strategy for Future Research Activity |
令和4年度以降は令和3年度までに実施予定であった講座保存の歯周病原細菌に高温と低温の影響について設定した時間ごとに菌体を回収し、RNAを精製後、アレイ解析を実施する予定である。著しく発現量が変化する遺伝子について、リストの原案を完成されることを目指している。また遺伝子の発現量について詳細に検討するリアルタイムPCRを継続する。実際の歯周罹患者からのサンプルにて予備実験を実施することにしている。
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Causes of Carryover |
令和3年度実施予定だったマイクロアレイ実験の回数が予定より少なかったこと、国際学会にて発表する予定で予算を組んでいた旅費がコロナ禍により執行できなかったことがあげられる。令和4年度以降、国際学会が現地開催であれば執行する予定であり、Web開催であれば、学内共用である遺伝子解析ソフトのライセンス(1年分)に充てる予定にしている。
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Research Products
(2 results)