2022 Fiscal Year Annual Research Report
三次元培養筋におけるコレシストキニン遺伝子発現制御および分泌動態の解明
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20K11434
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| Research Institution | Osaka Institute of Technology |
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Principal Investigator |
中村 友浩 大阪工業大学, 工学部, 教授 (30217872)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
北村 憲司 広島大学, 自然科学研究支援開発センター, 准教授 (40214811)
藤里 俊哉 大阪工業大学, 工学部, 教授 (60270732)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | コレシストキニン / 骨格筋 / 低酸素 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
2022年度は、マウス筋細胞株C2C12におけるCckタンパク質の発現動態およびHif1a siRNAを利用した遺伝子のノックダウンによるCck遺伝子の発現への影響とそのメカニズムについて再検証した。その結果、平面培養条件の分化期においてCck遺伝子の構成的な発現上昇が再確認された。低酸素特異的な転写因子であるHif1aとの直接的な関与を検討するために、Hif1a siRNAを利用した遺伝子のノックダウンによるCck遺伝子の発現への影響を再検証したところ、Hif1a発現のノックダウンでCck遺伝子発現が著しく低下することが明らかとなり、再現性も確認することができた。Cck遺伝子は筋分化とともに発現が上昇するので、Hif1a発現のノックダウンによって筋分化抑制が生じている可能性があると仮定し、筋特異的な転写因子の遺伝子発現を検証したところ、意外にもHif1a発現のノックダウンによって筋特異的な転写因子遺伝子群や総ミオシン遺伝子発現は増加していることが明らかとなった。また、Hif1a発現のノックダウンによる細胞周期関連の遺伝子発現動態も検討したが影響は見られなかった。さらに生体筋では、Cck遺伝子はTrim33タンパク質にて抑制されていることが知られているため、Hif1a発現のノックダウンによるTrim33遺伝子についても検討したが、その発現量に影響は見られなかった。今後は３次元培養筋に対するHif1a発現のノックダウンの実験手法を確立するとともに、Cckタンパク質の分泌動態の検証や筋分化におけるCck遺伝子の役割について詳細な検証を実施予定である。
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| Remarks |
3次元培養筋における機械的除負荷はタンパク質合成を抑制し、筋萎縮を引き起こす https://www.u-presscenter.jp/article/post-48051.html
「骨格筋由来の生理活性物質であるIrisinは骨格筋収縮により分泌される」 https://www.u-presscenter.jp/article/post-48206.html
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