2021 Fiscal Year Research-status Report
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20K15225
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| Research Institution | Kobe Gakuin University |
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Principal Investigator |
黒井 邦巧 神戸学院大学, 薬学部, 助教 (70757757)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | ダイアモンドアンビルセル |
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| Outline of Annual Research Achievements |
前年度において、顕微観察に特化した高圧セル（DAC）の製作を行った。今年度は、まずDACを用いて基礎的な検討を行った。DACでは、ステンレス製ガスケットの穴部に試料を導入して、トルクを加えていくことで圧力発生を行う。トルク発生はトルクドライバーを用いて行い、DACに封入した重水中の硫酸バリウム粉末の1000 cm-1付近の赤外吸収ピーク位置から、発生圧力の見積りを行った。トルクと発生圧力の関係を明らかにした。一方、顕微観察ではDAC内の観察が、前年度に購入した長距離作動レンズを用いれば十分可能であることが分かった。しかしながら、本研究計画で利用予定であった、所属大学の共用設備である共焦点レーザー走査型蛍光顕微鏡（CLSM）が度重なる故障に見舞われたため、顕微測定による研究は十分に進められなかった。そこで、DPPCなどのモデル脂質膜から作成したリポソームを用いた赤外分光によるバルク測定などの準備を進めた。また、CLSMを用いたDAC内での細胞測定に向けて、DAC基盤上への培養細胞の定着条件（細胞培養）の検討なども行った。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
本研究計画で利用予定であった、所属大学の共用設備である共焦点レーザー走査型蛍光顕微鏡が度重なる故障に見舞われたため、顕微測定による研究が十分に進められなかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
共焦点レーザー走査型蛍光顕微鏡（CLSM, FV-1000）を用いた蛍光相関分光（FCS）測定・蛍光回復（FRAP）測定を用いて、高圧下でのFCS測定を進めて行く。細胞膜に埋めた蛍光プローブのFCS測定から、単一細胞レベルでの高圧下の細胞膜挙動を追跡する予定である。準備実験として、DPPCなどのモデル脂質膜を用いて、膜中の蛍光プローブ挙動の圧力応答の確認を先に行う。その結果を踏まえた上で、生細胞での測定を進めていく。
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| Causes of Carryover |
1000円以下の端数までを使い切ることが困難であったため。次年度は320円分を併せて研究計画通りに使い切る予定である。
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Research Products
(4 results)
