2020 Fiscal Year Research-status Report
Tac1ニューロンによる哺乳類の発情行動制御メカニズムの解明
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20K15650
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| Research Institution | Okayama University of Science |
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Principal Investigator |
中村 翔 岡山理科大学, 獣医学部, 助教 (50829223)
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2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | ロードシス / 発情行動 / Tac1 / Fos |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的は、Tac1ニューロンの神経ネットワークに着目し、雌における発情行動の神経メカニズムを解明することである。
今年度は、発情行動発現時に雌の脳内の腹内側核、扁桃体、乳頭体前核、分界条床核等においてTac1ニューロンが活性化するか、神経細胞の活性化マーカーを指標に検討した。発情行動（ロードシス）を示した1時間後に灌流固定し脳を摘出した。その後、凍結切片を用いてTac1のin situ hybridizationおよびc-Fosの免疫組織化学による二重染色を試みた。その結果、いずれの神経核においても発情行動の発現によってc-Fos免疫陽性Tac1ニューロンの割合が上昇していたことから、Tac1ニューロンは発情行動に関連することが示唆された。次年度は、交尾におけるどの刺激がTac1ニューロンを活性化するのか挿入刺激等がTac1ニューロンに及ぼす影響について検討する計画である。
また、Tac1ニューロンの発情行動における機能を明らかにするため、CRISPR-Cas9を用いたゲノム編集によりTac1 KOラットの作製を試みた。rGONAD法を用いてCRISPR-Cas9を卵管中の受精卵に導入したところ、Tac1+/-の始祖系統を得た。次年度は、Tac1 KOラットを系統化し、性行動を解析する計画である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
発情行動によって活性化するTac1ニューロンの局在を明らかにすることができた。また、Tac1遺伝子を欠損したラットの作製にも成功したため。
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| Strategy for Future Research Activity |
次年度は、交尾におけるどの刺激がTac1ニューロンを活性化するのか挿入刺激等の影響について検討する計画である。また、Tac1 KOラットの発情行動を解析し、Tac1ニューロンの発情行動における機能を明らかにする計画である。KOラットの表現型が顕著でない場合は、アンタゴニスト等の薬剤の脳内への局所投与による影響も合わせて解析する。
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| Causes of Carryover |
新型コロナウイルスの蔓延により複数学会の開催が延期あるいはオンラインでの開催に切り替わったため、当初予定していた旅費としての支出がなくなったこと、さらに当初の予定よりも早く遺伝子改変ラットの作製を進められたことにより、Cas9やgRNAなどの高額な試薬を節約することができたため。
次年度は、当初着目していたTac1ニューロンの解析に加え、繰り越した予算を使用して発情行動に関連するその他の因子についてもその機能を明らかにするため、新たな遺伝子改変ラットの導入やウイルスを用いた神経経路の解析を計画している。
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