2020 Fiscal Year Research-status Report
シングルセル解析による精巣性テラトーマへの分化運命決定機構の解明
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20K15690
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Research Institution | Kyoto University |
Principal Investigator |
宮嵜 岳大 京都大学, 医学研究科, 助教 (40826591)
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Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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Keywords | 精巣性テラトーマ |
Outline of Annual Research Achievements |
テラトーマは始原生殖細胞を起源とした3胚葉性の組織が無秩序に塊あった腫瘍である。テラトーマには、分化途中の細胞や時には全能性をもつ胚性癌腫細胞(EC細胞)が存在し、分化した細胞を次々に作り出す。マウスでは精巣性テラトーマ形成に関連する遺伝子座が同定され(Youngren et al., Nature 2005)研究が進んだが、なぜ正常な配偶子形成過程から逸脱し、3胚葉性の組織が分化するかはわかっていない。そこで、新たな視点から解析する必要がある。 これまでに行なってきたマウス胎仔精巣移植によってテラトーマの形成を誘発させる実験的精巣性テラトーマ(Miyazaki T. et al., Mammalian Genome, 2014; Miyazaki T. et al., Zoological Science, 2018)実験系を用い、シングルセルRNAシークエンス(ScRNA-Seq)解析によりテラトーマを形成するような稀な生殖細胞のクラスタリングを行う予定であったが、所属の変更やコロナの影響もあり思うように研究を進めることが困難であったため、シングルセル解析を行うことが出来なかった。しかしこれまでに同定した実験的精巣性テラトーマ形成関連遺伝子についてはレンチウイルスやアデノ随伴ウイルスを用いたスクリーニング系を構築中である。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
所属の変更やコロナの影響もあり思うように研究を進めることが困難であったため、シングルセル解析を行うことが出来なかった。しかし、生殖巣の器官培養については実施しており、これら培養系とレンチウイルスやアデノ随伴ウイルスを用いた候補遺伝子のノックアウト・ノックダウン・強制発現によるテラトーマ形成の関連遺伝子のスクリーニング系については現在構築中である。
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Strategy for Future Research Activity |
昨年度、実施することが出来なかったシングルセル解析等のRAN・ゲノム解析を中心に進め、テラトーマ形成に関与する関連遺伝子の絞り込みを行う。シングルセルシークエンスについては所属機関の共用研究機器であるChromium(10X genomics)を使用し解析を行う予定である。 昨年度同様に、レンチウイルス、アデノ随伴ウイルスを用いたテラトーマ形成関連遺伝子のスクリーニング系の確立を行う。
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Causes of Carryover |
コロナの影響により、本来の計画通り研究を行うことが困難であったために次年度に繰越を行なった。次年度は、実施できなかった解析を行うため、予定通り使用が見込めると思われる。
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