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2020 Fiscal Year Research-status Report

Deciphering the intercellular signaling via extracellular vesicles by lipid-recognizing GPCRs

Research Project

Project/Area Number 20K15790
Research InstitutionOsaka University

Principal Investigator

曽宮 正晴  大阪大学, 産業科学研究所, 助教 (50788974)

Project Period (FY) 2020-04-01 – 2022-03-31
Keywords細胞外小胞 / 受容体 / 脂質
Outline of Annual Research Achievements

細胞外小胞の脂質成分を認識するGPCRを特定するため、まずは複数のヒト細胞株において、脂質成分に応答する細胞株の選別を行った。その結果、複数の細胞株で反応が得られたものの、一部の細胞では全く反応が見られなかった。この結果は、GPCRの細胞株ごとの発現パターンの違いを反映しているものと考えられる。
次に、レポーター遺伝子を使用したスクリーニングによってヒトGPCRを網羅的に探索した。その結果、複数のGPCRで脂質成分に反応するものが得られた。得られたGPCRについては、その機能や性質を解析している。また、これまでにスクリーニングの性質を考慮して、さらに別の選抜法を行うべきであると考え、脂質成分に反応するGPCRを選抜するための新たな実験法を考案し、検討中である。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

これまでにスクリーニング系によって脂質成分に反応するGPCR候補を複数同定しており、比較的順調に研究は進んでいると判断している。また、脂質成分に反応する細胞株と反応しない細胞株の選別も完了しており、これらの比較から目的のGPCRを絞り込むことができている。

Strategy for Future Research Activity

スクリーニングでヒットしたGPCRについて、その機能を詳細に解析する。ヒットしたGPCRについては、複数の変異体を作成し、脂質認識部位を特定する。また、GPCRの下流シグナルを解析して、その生理的意義を解明することを目指す。

Causes of Carryover

研究の進捗に応じて使用額を調整した結果、次年度に持ち越す事が合理的と判断した。翌年度には物品費として使用する予定である。

  • Research Products

    (2 results)

All 2021

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 1 results)

  • [Journal Article] Real-Time Luminescence Assay for Cytoplasmic Cargo Delivery of Extracellular Vesicles2021

    • Author(s)
      Somiya Masaharu、Kuroda Shun’ichi
    • Journal Title

      Analytical Chemistry

      Volume: 93 Pages: 5612~5620

    • DOI

      10.1021/acs.analchem.1c00339

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Reporter gene assay for membrane fusion of extracellular vesicles2021

    • Author(s)
      Somiya Masaharu、Kuroda Shun’ichi
    • Journal Title

      bioRxiv

      Volume: - Pages: -

    • DOI

      10.1101/2021.02.16.431359

URL: 

Published: 2021-12-27  

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