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2021 Fiscal Year Research-status Report

LSRが担うがん代謝リプログラミングと細胞間接着制御の分子機構

Research Project

Project/Area Number 20K16196
Research InstitutionSapporo Medical University

Principal Investigator

高澤 久美  札幌医科大学, 医学部, 助教 (50359709)

Project Period (FY) 2020-04-01 – 2023-03-31
KeywordsLSR / cell adhesion
Outline of Annual Research Achievements

脂質分解刺激に応じて機能するリポタンパク質受容体として当初同定されたlipolysis-stimulated lipoprotein receptor(以下、LSR)は、後年、細胞間接着装置の一つであるタイト結合に局在するタンパク質として再発見された。LSRは脂質代謝と細胞間接着という、一見独立した二つの機能を合わせ持つユニークなタンパク質であることが明らかとなった。我々は、子宮頸部腺がんにおけるタイト結合関連タンパク質の発現解析を行う中で、LSRが腫瘍領域で異常発現することを見出した。さらに、細胞株を用いた実験で、LSRの発現変動が、細胞間接着装置に影響を及ぼすと同時に、脂質代謝を変動させる可能性を見出した。本研究では、腫瘍で高発現するLSRが癌悪性化の過程でどのような役割を果たしているかを、とくに脂質代謝を含む癌代謝リプログラミングと細胞接着に着目して、明らかにすることとした。
これまでに、子宮頸部腺がん、乳がん手術材料に対して、抗LSR抗体を用いて免疫組織化学を行い、その染色態度を評価した。その結果、非腫瘍性の頸管腺上皮、乳管上皮と比較して、それぞれのがん成分においてLSRの発現態度には有意な差が認められた。LSRの発現欠損株と対照となる細胞株で比較プロテオーム解析を行ったところ、細胞間接着に関連する遺伝子オントロジー(GO) termが複数検出された。乳がんの複数の細胞株を用いてLSRの発現解析を行ったところ、複数の薬剤曝露によりLSRの発現が増加することを確認した。現在、薬剤刺激により活性化され、LSRの発現調節を行っているシグナル経路の探索を行っている。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

頸部腺がん手術材料、乳がん手術材料を用いた抗LSR抗体による免疫組織化学的検討では、非腫瘍性上皮と比較してがん組織でLSRの発現態度に有意な差が認められ、良好な結果を得られた。CRISPR-cas9システムを用いてLSRの発現欠損細胞株を作製し、コントロール細胞との比較プロテオーム解析を実施したところ、3000個程度のタンパク質を同定することができた。有意に発現変化しているタンパク質について遺伝子オントロジー(GO)エンリッチメント解析を実施したところ、細胞間接着に関連するGOtermが複数検出された。また、RNAseqを実施したところ、コントロール細胞と比較して有意に発現低下している遺伝子が800個程度同定され、トランスクリプトーム解析においてもGO解析で細胞間接着に関連するGOtermが複数エンリッチされていることが明らかとなった。これらの発現変動をふまえて、さらに細胞生物学的な解析を進めたところ、LSR発現欠損細胞株では、コントロール細胞と比較して細胞接着機能が低下していることが明らかとなった。乳がん細胞株を用いた検討では、複数の薬剤曝露でLSRの発現が増加することが確認され、現在はシグナル経路の解析を行っている。

Strategy for Future Research Activity

LSR発現と病理組織学的因子及び予後との相関について検討を行う。LSR発現欠損株にLSR発現ベクターを導入し、LSR発現回復細胞株を樹立し、LSR発現に調節を受けるたんぱく質を網羅的に探る予定である。各細胞株に対してトランスクリプトーム解析、プロテオーム解析、リピドーム解析などの網羅的な解析を実施し、統合解析を実施する予定である。また、脂質などの細胞株への曝露によるLSRの発現変化を解析する予定である。

Causes of Carryover

コロナウイルス感染症まん延の影響により、予定していた実験計画に遅れが生じた。コロナウイルス感染症の広がりを考慮しつつ、実験を行ったが、最終的に次年度使用額が生じることになった。次年度については、本年度実施できなかった実験を合わせて施行する予定である。

  • Research Products

    (9 results)

All 2022 2021

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 4 results,  Open Access: 3 results) Presentation (5 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results)

  • [Journal Article] Aberrant expression of claudin‐6 contributes to malignant potentials and drug resistance of cervical adenocarcinoma2022

    • Author(s)
      Ito Yui、Takasawa Akira、Takasawa Kumi、Murakami Taro、Akimoto Taishi、Kyuno Daisuke、Kawata Yuka、Shano Kodai、Kirisawa Kurara、Ota Misaki、Aoyama Tomoyuki、Murata Masaki、Sugimoto Kotaro、Chiba Hideki、Saito Tsuyoshi、Osanai Makoto
    • Journal Title

      Cancer Science

      Volume: 113 Pages: 1519~1530

    • DOI

      10.1111/cas.15284

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Claudin-18.2 as a therapeutic target in cancers: cumulative findings from basic research and clinical trials2022

    • Author(s)
      Kyuno Daisuke、Takasawa Akira、Takasawa Kumi、Ono Yusuke、Aoyama Tomoyuki、Magara Kazufumi、Nakamori Yuna、Takemasa Ichiro、Osanai Makoto
    • Journal Title

      Tissue Barriers

      Volume: 10 Pages: 1967080

    • DOI

      10.1080/21688370.2021.1967080

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Regulatory roles of claudin-1 in cell adhesion and microvilli formation2021

    • Author(s)
      Takasawa Kumi、Takasawa Akira、Akimoto Taishi、Magara Kazufumi、Aoyama Tomoyuki、Kitajima Hiroshi、Murakami Taro、Ono Yusuke、Kyuno Daisuke、Suzuki Hiromu、Osanai Makoto
    • Journal Title

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      Volume: 565 Pages: 36~42

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2021.05.070

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] A systemic apolipoprotein A-IV-associated amyloidosis confirmed by proteome analysis2021

    • Author(s)
      Murakami Taro、Takasawa Akira、Moriki Asako、Igaki Yusuke、Ikeda Hiroshi、Murase Kazuyuki、Takada Kohichi、Magara Kazufumi、Aoyama Tomoyuki、Ono Yusuke、Kyuno Daisuke、Takasawa Kumi、Murata Masaki、Osanai Makoto
    • Journal Title

      Virchows Archiv

      Volume: 479 Pages: 1041~1046

    • DOI

      10.1007/s00428-021-03073-x

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] Roles of claudin-1 in cell adhesion and microvilli formation of cervical adenocarcinoma cells2021

    • Author(s)
      Kumi Takasawa, Akira Takasawa, Taishi Akimoto, Kazufumi Magara, Tomoyuki Aoyama, Yusuke Ono, Daisuke Kyuno, Makoto Osanai.
    • Organizer
      The 39th Sapporo International Cancer Symposium
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Abberant high expression of ALDOA contributes to the malignant transformation of uterine cervical adenocarcinoma2021

    • Author(s)
      Akira Takasawa, Yuki Saito, Kumi Takasawa, Taishi Akimoto, Kazufumi Magara, Tomoyuki Aoyama, Yusuke Ono, Daisuke Kyuno, Yoshihiko Hirohashi, Tsuyoshi Saito, Makoto Osanai.
    • Organizer
      The 39th Sapporo International Cancer Symposium
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 乳癌におけるALDOA発現とその病理学的意義2021

    • Author(s)
      桐澤くらら、高澤啓、伊藤祐依、車野晃大、小野祐輔、青山智志、高澤久美、小山内誠
    • Organizer
      第67回 日本病理学会秋期特別総会
  • [Presentation] 悪性神経鞘腫のFFPE組織標本を用いた新規バイオマーカー探索の試み2021

    • Author(s)
      車野晃大、高澤啓、伊藤祐依、桐澤くらら、青山智志、小野祐輔、高澤久美、及能大輔、小山内誠
    • Organizer
      第67回 日本病理学会秋期特別総会
  • [Presentation] 子宮頸部腺癌におけるclaudin-6発現とその意義2021

    • Author(s)
      伊藤祐依、高澤啓、桐澤くらら、車野晃大、青山智志、小野祐輔、高澤久美、小山内誠
    • Organizer
      第67回 日本病理学会秋期特別総会

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Published: 2022-12-28  

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