2021 Fiscal Year Research-status Report

ピロリ菌の小さなRNAによる胃炎症メカニズムの解明

Research Project

Project/Area Number	20K16244
Research Institution	Nagoya University
Principal Investigator	木下遼名古屋大学, 医学系研究科, 特任助教 (50846566)
Project Period (FY)	2020-04-01 – 2023-03-31
Keywords	ヘリコバクター・ピロリ / small RNA / TLR3
Outline of Annual Research Achievements	ヘリコバクター・ピロリ (ピロリ菌)は世界人口の約半数に感染する細菌で、胃がんや胃十二指腸潰瘍などの消化器疾患を引き起こす大規模感染症である。また、細菌の保有するリポ多糖（LPS）はToll like receptor 4 (TLR4)のリガンドで炎症反応を惹起する。しかしながら、ピロリ菌のLPSは低いエンドトキシン活性しか示さないことが報告されており、ピロリ菌による胃炎症メカニズムは不明な点が多く、混沌としているのが現状である。そこで本研究課題では、ピロリ菌の保有するsmall RNA（sRNA）による胃粘膜上皮細胞のdouble-stranded RNA受容体 (TLR3)を介した胃炎症メカニズムの解明を目指している。当該年度では、ピロリ菌由来のsRNAの胃炎における役割を検討した。ピロリ菌由来のトータルsRNAを胃粘膜上皮細胞に直接添加すると、TLR3を介して炎症反応が惹起されることをウェスタンブロッティングで確認した。また、昨年度実施して得られた研究結果から、ピロリ菌の細胞外sRNAの二次構造を予測し、double-stranded RNA領域が多く含まれているsRNAを合成した。さらに、複数の胃粘膜上皮細胞株を用いてリアルタイムPCRによりTLR3とTLR4の発現量を解析したところ、TLR3の発現量はTLR4に比べて発現量が高い、もしくは同程度であることを確認している。これらのことから、ピロリ菌のsRNAによるTLR3を介した胃炎症メカニズムの可能性が示唆された。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 研究は順調に推移しており、現在までに実施した実験によって、ピロリ菌のsRNAによる胃炎症メカニズムの一端を明らかにできた。
Strategy for Future Research Activity	これまでに得られた研究成果により，ピロリ菌のsRNAによるTLR3を介した胃炎症メカニズムの可能性が示唆された。次年度は、どのピロリ菌のsRNAがTLR3に認識されるかを解析する。また、認識されたsRNAがTLR3に結合するかを確認する。