保護的末梢血単核球を用いた脳梗塞治療法の機序の解明

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K16485
• Research Institution: Niigata University
• Principal Investigator: 畠山 公大 新潟大学, 医歯学総合研究科, 特任助教 (20843618)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 低酸素低糖刺激 / 末梢血単核球 / 脳梗塞 / 再生医学 / 細胞療法

Outline of Annual Research Achievements

申請者らはこれまで，脳梗塞に対する簡便・安全な細胞療法として，低酸素低糖（oxygen-glucose deprivation: OGD）刺激をした，末梢血単核球（peripheral blood mononuclear cells: PBMC）に着目して研究を行ってきた．
申請者は，これまで(1)PBMCにOGD刺激を加えることにより，PBMCが保護的極性に変化し，血管内皮増殖因子（VEGF）などの組織保護因子を分泌すること，(2)OGD刺激したPBMC（OGD-PBMC）を脳梗塞7日後のラットに投与すると，投与3日目の時点でPBMCが脳内に移行していること，(3)OGD-PBMC投与21日目のラットの脳内でVEGFの発現が亢進していること、(4)OGD-PBMC投与21日後のラットんお脳内で血管新生・軸索進展が亢進していること，(5)OGD-PBMC投与ラットで脳梗塞後遺症が改善することを示した．その一方で，(1)OGD-PBMC投与21日後にラットの脳内で発現が亢進していたVEGFが，どのような細胞から分泌されているのか，また，(2)OGD-PBMC投与21日後認められた 軸索進展がどのような機序によるのか，という点について分かっていない.

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

免疫組織学的検討における条件検討に時間を要している．

Strategy for Future Research Activity

OGD-PBMC投与ラットの脳標本を用いて，VEGFと細胞特異的マーカーの二重染色を行い，VEGFを発現している細胞腫の特定を行う．また，細胞投与3日目と21日目の標本を比較することで，その時間的変化を検討する．
また，酸素化が神経再生に与える影響を検討するため，脳梗塞モデルラットにピモニダゾールを投与する．ピモニダゾールとCD31, Tbr2, Doublecortinの二重染色を行い，血管新生と酸素化，および酸素化と神経幹細胞の分化との関連を組織学的に検討する．

Causes of Carryover

免疫組織学的研究に遅延が生じたため．前年度実施予定だった組織学的検討を次年度実施する．