2020 Fiscal Year Research-status Report
The investigation between psychiatric disorders and neuroinflammation focused by interleukin 18
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20K16680
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| Research Institution | Hyogo Medical University |
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Principal Investigator |
山西 恭輔 兵庫医科大学, 医学部, 特任助教 (50626786)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | インターロイキン18 / うつ病 / ストレス / 神経免疫 / 脳内炎症 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ヒト中枢神経細胞株のSh-sy5yにおいて、炎症性サイトカインであるIL-18、及びIL-18受容体の発現をWestern blotting、及び蛍光免疫染色で確認した。その後、Sh-sy5yにIL-18を投与し、レチノイン酸を使用して分化誘導を行ったが、分化誘導の度合い(神経突起の長さなど)に有意な変化は確認されなかった。この細胞に対し、Hypoxia-再灌流負荷、グルタミン酸によるストレス負荷を行ったところ、先行研究と同様の結果が確認された。グルタミン酸の投与量は20μg、40μg、80μgで有意差が確認され、現在、組換えIL-18と併用する事による細胞障害性変化を観察している段階である。
動物実験においては、社会的敗北ストレスを行ったが、行動実験を評価する環境を整えるのに時間がかかった点、及び予備実験結果が当初の計画通りではなかったため、研究計画を「予想された結果と異なった結果となり、計画通り研究が進まない場合」に変更し、ストレス負荷の種類を拘束ストレスへ変更した。その結果、野生型マウスとIL-18欠損マウスとの間で予備実験結果からも有意な結果が出ており、現在結果の解釈を行っている段階である。行った行動実験はオープンフィールド試験、尾懸垂試験、強制水泳試験、スクロース摂取試験である。解析については、海馬・前頭前野を中心に解析を行っており、海馬におけるRNA-Seqでの解析や海馬でのNeurogenesisを中心とした免疫染色で評価を行っている段階である。現在結果については解析を行っている段階であり、公表段階ではない。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
当初の実験計画では、細胞実験において分化誘導実験を2021年度中に行う予定であったが、当初の計画を大きく進み、2021年度中に細胞へ負荷するストレスの種類の検討まで行う事ができた。途中、細胞の分化に多少のばらつきがあるなどのアクシデントがあったが、それを打ち消し、当初の計画より進んでいる。
動物実験においては既に記載のように実験が思うように進まず研究計画を少し変更したが、行動実験・解析実験がおおむね計画通り進行している。上記を総合的に判断し、当初の計画より進展していると判断した。
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| Strategy for Future Research Activity |
細胞実験に関しては当初の計画通り、進める予定である。
動物実験においては、ストレスを当初社会的敗北ストレスを計画していたが、実験環境が整わない問題と予備実験の結果が想定よりも外れているため、実験計画書に記載のように計画が進まない場合の拘束ストレスでの検証を行っている。こちらは有意な予備実験結果が出ており、上記の当初の計画とは違っているが、進行具合として当初の計画通り進行出来ている段階にある。引き続き、研究計画書に記載に沿って進める予定である。
2021年度は国際学会で1回、国内学会で1回発表を予定している。(新型コロナウィルスの影響でいずれもオンライン形式)
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| Causes of Carryover |
2020年度は動物実験にかかる費用や消耗品の費用を既に所持していたストックより使用した為、使用費用が少なかった。また研究支援者からのサポートもあり、支出を当初の計画より少なく済ませる形となった。
2021年度に動物実験維持費、系統維持費、消耗品や学会発表、英文校正などを使用する予定である。
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