新生児慢性肺疾患患児のRSV感染重症化機構の解明

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K16860
• Research Institution: Fukushima Medical University
• Principal Investigator: 宮崎 恭平 福島県立医科大学, 医学部, 博士研究員 (70769497)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 慢性肺疾患 / 高濃度酸素曝露 / RSウイルス

Outline of Annual Research Achievements

RSウイルス(RSV)は乳幼児の気管支肺炎の主要な原因ウイルスである。早産児の合併症である慢性肺疾患(BPD)児はRSV感染により重症化することが知られているが重症化のメカニズムは解明されていない。R３年度はR２年度に引き続き、樹立させたBPDマウスモデルにRSVを感染させ、BPDマウスのRSV感染モデルを作成し、感染後の炎症反応の違いを検討した。生後12時間以内のBALB/c新生児マウスを大気下と95%高濃度酸素下にそれぞれ7日間飼育し、コントロールマウス、BPDマウスとした。それらを大気下で１ヶ月間飼育し5 -6週齢のマウスを実験に用いた。RSVはA2株をHep-2細胞を用いて培養し、
-80°Cで保存しておいたものを使用した。RSV、紫外線で不活化したRSV、培地のみ（コントロール）の３群として10uLずつ経鼻的に感染させた。 感染後2、4、6日のマウス肺からmirVANA-microRNA isolation kitを用いてmRNAを抽出した。定量的PCR法を用いて、IL-4, IL-13, POSTN ｍRNA量を測定した。コントロール、紫外線不活化RSVに比べ、RSV-BPD群で感染後４、７日目の肺組織中IL-4, IL-13 mRNAの上昇を認めた。POSTNは変化を認めなかった。本実験により、RSVの感染性によるBPDマウスモデルの炎症反応の違いが示された。今年度もRSV感染によるBPDマウスモデルの炎症生サイトカイン産生の違いを示すことができた。慢性肺疾患児のRSV感染重症化メカニズム解明へ向けてさらなる研究を進めていく。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

新型コロナウイルス感染症の流行により、動物実験が予定通り進まなかったため。

Strategy for Future Research Activity

次年度は、BPD-RSV感染モデルにける重症化メカニズムを明らかにするため、関与しているmicroRNAを同定し、これを標的microRNAとして、促進剤、抑制剤 を用いて、in vitro、in vivoで解析を行う。また、ヒトでの解析も進めていく。福島県立医科大学小児科に入院したRSV罹患児、非罹患児の気道吸引物を用いて micro array解析を行い、マウスの結果と合わせ、重症化の標的micro RNAを同定していく予定である。

Causes of Carryover

新型コロナウイルス感染症の流行により、旅費の支出がなかったため。