オルガノイド培養による原発性硬化性胆管炎の細胞外小胞を介した新規炎症機序の解明

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K17010
• Research Institution: Yamagata University
• Principal Investigator: 勝見 智大 山形大学, 医学部, 助教 (70637355)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 細胞外小胞

Outline of Annual Research Achievements

原発性硬化性胆管炎(Primary Screlosing Cholangitis: PSC)は胆管障害による細胆管増生反 応と輪状線維化を特徴とするがその病因は未だ解明されていない。また根治的治療は肝移植 のみであるのが現状である。申請者らは以前にPSCモデルマウスからTRAIL receptor signalが PSC胆管炎制御因子であることを特定し、胆管上皮細胞由来の細胞外小胞(EVs)がマクロ ファージを活性化し炎症・線維化を誘導することを初めて解明した。
本研究ではこれらの成果を発展させ、胆管障害後の再生反応と考えられている細胆管増生反応細胞が炎症と線維化を惹起する主細胞であることを明らかにし、その制御因子として EVsが病態形成に関与していることを解明する。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

当該年度では胆管上皮細胞株の培養と、細胞から放出されるEVsを超遠心法にて回収した。回収EVsはNTA解析にて濃度とそのサイズを特定し得た。現在は回収したEVsを用いて主に炎症細胞であるマクロファージに添加し、反応を確認している。

Strategy for Future Research Activity

今後は胆管上皮細胞由来EVsを用いた刺激実験を行い、刺激後のマクロファージから産生される炎症性サイトカイン測定や、肝星細胞にも同様の実験を行い、線維化マーカーの測定を行っていく予定である。

Causes of Carryover

in vitro実験での培養液やEV回収のためのチューブ使用が当初より多く必要となったため。