2020 Fiscal Year Research-status Report
Selective stimulation of intrahepatically primed HBV-specific T cells for curing hepatitis B
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20K17028
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
河島 圭吾 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 助教 (00852104)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | B型肝炎ウイルス / T細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
B型肝炎ウイルス（hepatitis B virus; HBV）の排除には、機能的なHBV特異的CD8+T細胞の誘導が重要である。本研究は、「T細胞の共刺激シグナルであるOX40の刺激が、HBV特異的CD8+T細胞を抗原依存的に活性化し、HBVを持続的に抑制するか」を解明することを目的に行なっている。
OX40シグナル刺激のHBV特異的T細胞応答およびHBV発現への影響を検討するため、HBV特異的ナイーブCD8+T細胞をHBVトランスジェニック(HBV-Tg)マウスに養子移入すると同時に、OX40刺激抗体を投与した。その結果、抗体投与後3日目には、肝臓内HBV特異的CD8+T細胞は機能的なT細胞へと分化したが、7日目にはすでにその機能性は抑制されていた。さらに、肝臓内HBV-mRNA量は抗体投与後3日目には減少し始め、7日目にはさらに低下していた。
続いて、その抗HBV効果の持続性を検討するために、T細胞養子移入およびOX40刺激抗体投与後の血清HBs抗原量を、さらに長期的にモニタリングした。興味深いことに、血清HBs抗原はOX40抗体の投与7日後から有意に減少し始め、21日後には抗体投与前の1000分の1以下にまで減少した。さらに、OX40抗体投与38日後まで血清HBs抗原の再上昇は認めず、また肝臓内HBV-mRNAも抑制され続けていた。
これらの結果は、OX40シグナルの刺激により、HBV特異的CD8+T細胞の機能的分化が誘導されること、さらには、その一過性の誘導によりHBV-mRNAの転写が抑制され続けていることを示している。すなわち、OX40シグナル刺激は、B型慢性肝炎の治療目標である機能的治癒（HBsAgの消失）に貢献する可能性がある。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本研究の実験計画では、大まかに2つの実験を予定していた。すなわち、実験１「OX40刺激は、HBV特異的T細胞の機能的分化を誘導し、持続的にHBVを抑制するか？」と実験２「OX40刺激のHBV特異的T細胞に対する影響は、抗原刺激に依存するか？」である。現時点で、実験1がほぼ終了しており、実験は概ね予定通り進行している。
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| Strategy for Future Research Activity |
2年目は、実験２「OX40刺激のHBV特異的T細胞に対する影響は、抗原刺激に依存するか？」を中心に検討していくことを予定する。実験計画で示した通り、通常のHBVを発現していないB6マウスにHBVペプチドを投与し（全身性の抗原刺激）、HBV-Tgマウスの場合（肝臓内での抗原刺激）のT細胞応答と比較する。またin vitroの実験で、抗原量とOX40発現の相関性を検討する。
また、実験1「OX40刺激は、HBV特異的T細胞の機能的分化を誘導し、持続的にHBVを抑制するか？」に関しては、概ね検討できているが、さらなる長期的な経過観察やHBV抑制のメカニズムに関しても、場合によっては検討に加える。
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| Causes of Carryover |
今年度の実験は、既存の試薬を主に使用し遂行できた部分もあったため、消耗品費の使用が抑えられた。次年度はフローサイトメトリーなど試薬を多く使用する実験が中心となり、消耗品費が多額になる予定であるため、次年度に繰越した研究費を使用する予定である。また、コロナウイルス蔓延の影響で、プラスチック製品やチップ類などの不足、海外輸送の遅れ等により、今年度に購入できなかった物品もあるため、これらの購入は次年度に予定する。
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