間葉系幹細胞を用いた細胞シート療法よる進行した慢性腎臓病の治療効果の検討

2022 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 20K17262
• Research Institution: Tokyo Women's Medical University
• Principal Investigator: 宮部 陽永 東京女子医科大学, 医学部, 准講師 (40815792)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 慢性腎臓病 / 細胞シート / 骨髄由来間葉系幹細胞 / 虚血再灌流障害

Outline of Annual Research Achievements

ラット腎虚血再灌流障害（Ischemic reperfusion injury: IRI）後に線維化を認める腎臓に対して間葉系幹細胞（Mesenchymal stem cell: MSC）細胞シートを移植することで、「MSCを用いた細胞シート療法による進行した慢性腎臓病（Chronic kidney disease: CKDの治療効果の検討」を目的とし、進展したCKDを抑制して根本的治療に繋げることで、CKDの予後を改善する新規治療法の開発を目指した。
2020年は、GFP遺伝子導入SDラットの骨髄由来間葉系幹細胞（rBMMSC）の初代培養と継代を行って細胞シートを作成し、rBMMSCによる治癒効果を、HUVEC創傷治癒アッセイにてrBMMSC培養上清を添加したモデルで評価して、創傷治癒効果が高いことを確認した。
また、IRIモデルの確立を図り、7週齢で虚血時間40分の場合は平均Cr 1.8 mg/dLと上昇を認め、IRIによる腎機能悪化を確認し、さらにIRI後14日目にrBMMSC細胞シートを2枚移植し、細胞シート移植後14日目に犠牲死とし、細胞シート移植腎を摘出した。
2021年は、腎病理を確認したところ細胞シートによる治療効果が有意ではなかったため、既報を参考にして4枚に増やして移植した治療群を4匹、IRIのみで無治療群を4匹、IRIも未施行のsham群2匹と比較する方針とした。腎病理における線維化改善効果についてMasson Trichrome染色を施行したところ、線維化や治療効果のばらつきが大きかった。そのため、2022年は腎摘出時を含めた腎機能を評価したが有意差は認めなかった。ただ、腎組織では治療群で尿細管壊死や線維化の抑制を認めた。また治療効果に寄与した細胞を同定するためのRNA-seqにてAdra2cやLgr6、Fabp3、Sncaで有意差を認めた。