Innovation of novel therapeutic strategies using siRNA for ichthyotic lesions of KID syndrome

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 20K17315
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 滝 奉樹 名古屋大学, 医学部附属病院, 助教 (00846727)
• Project Period (FY): 2020-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: KID症候群 / GJB2

Outline of Annual Research Achievements

現在の遺伝子治療研究は、siRNAを始めとしたRNA干渉の技術の向上により、新たな段階を迎えている。本研究では、特にgain-of-function型優性変異による遺伝性皮膚疾患において、標的遺伝子の機能を抑制するsiRNAを用いて、変異遺伝子発現を抑制することによる治療効果の実証研究を目的とする。
keratitis-ichthyosis-deafness(KID)症候群は、角膜炎、魚鱗癬、聴覚障害を三主徴とする症候群で、コネキシン26をコードするGJB2遺伝子変異により生じる常染色体優性遺伝性の疾患である。コネキシンは、細胞膜上で6量体（コネクソン）を形成し、ヘミチャネルとして細胞内外の分子のやり取りをする他、細胞間の6量体同士が結合し、ギャップジャンクションを形成し、細胞間での分子のやり取りをする。KID症候群は、変異コネキシンのgain-of-functionによりヘミチャネル機能異常を起こし、常染色体優性の発症を示す。本研究では、この変異コネキシンの機能をsiRNAで抑制することにより、実際に魚鱗癬を治療する事で、この治療方略の有用性を実証することを目的とする。具体的には以下の目標を達成する。
1)GJB2遺伝子の塩基置換で魚鱗癬の症状を呈するKID症候群の疾患モデルマウスを作成し、遺伝子治療研究開発プラットフォームとする。
2)siRNAを用いて、変異遺伝子発現を抑制し、実際に魚鱗癬を治療する事で、この治療方略の有用性を実証する。
これらが実証されれば、様々なgain-of-function型優性遺伝皮膚疾患に応用が可能である。
本年度は、昨年度作成したGJB2遺伝子変異を導入したKID症候群モデルマウスを作成した。モデルマウスの表皮のDNAから、遺伝子導入した変異遺伝子の存在を確認し、現在バッククロスを行っている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

昨今のコロナウイルスの影響で、マウスの飼育数が制限され思うように交配が進まなかったため。

Strategy for Future Research Activity

モデルマウスが作成され次第、表現型の確認や、治療実験の方法などを検討していく。

Causes of Carryover

新型コロナウイルスの影響で、マウスの飼育数と、マウス舎への入室制限がかかり、上手くマウスが繁殖されなかったため、その後の実験に遅延が生じた。
昨年度行う予定であった実験を次年度に行わなければならなくなったため、次年度使用額が生じた。