2021 Fiscal Year Annual Research Report
皮膚UV誘発がんに高頻度で変異が見つかるがん抑制遺伝子Ppp6cの解析
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20K17365
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| Research Institution | Miyagi Prefectural Hospital Organization Miyagi Cancer Center |
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Principal Investigator |
加藤 浩之 地方独立行政法人宮城県立病院機構宮城県立がんセンター(研究所), がん薬物療法研究部, 共同研究員 (90770347)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | メラノーマ / マウス発がん実験 / PP6 / B-raf |
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| Outline of Annual Research Achievements |
脱リン酸化酵素PP6は、触媒サブユニット(Ppp6c)と制御サブユニットからなるホロ酵素である。我々が持つPpp6cF/Fマウスと、メラノーマ誘導マウス（Tyrosinase-CreERT2;BRAFF-V600E/+；PTENF/F）(Jackson 研)を掛け合わせて、以下の3種類（①、②、③）のマウスを作製した。これらのマウスの局所にタモキシフェンを塗布することで、その部分のメラノサイトに、変異型BRAF発現およびPpp6c欠損を誘導することができる。①変異型B-raf+Ppp6cホモ欠損：Tyrosinase-CreERT2; BRAF(F-V600E/+)；Ppp6cF/F②変異型B-raf+Ppp6cヘテロ欠損：Tyrosinase-CreERT2; BRAF(F-V600E/+)；Ppp6cF/＋③変異型B-raf+Ppp6c正常：Tyrosinase-CreERT2; BRAF(F-V600E/+)；Ppp6c＋/＋
上記3種類のマウスの背中を剃毛し、その皮膚にタモキシフェンを塗布した。1年以上の長期観察を行ったが腫瘍の発生はなかった。そこで、タモキシフェンを塗布した後にUVB照射をおこなったところ腫瘍が発生し、その頻度は、変異型B-raf+Ppp6cヘテロ欠損>変異型B-raf+Ppp6c正常>変異型B-raf+Ppp6cホモ欠損の順番であった。それらの腫瘍は病理組織学的にメラノーマと診断された。
Ppp6cヘテロ欠損型と野生型のメラノーマ腫瘍の次世代シークエンシングにより、検査したすべての組織でTrp53の変異が明らかになった。 さらに、Ppp6cヘテロ欠損型の腫瘍は、Ppp6c野生型の腫瘍よりもシグネチャー1（有糸分裂時計/ DNA複製エラーの蓄積）変異指数が高く、細胞分裂の増加を示唆していた。Ppp6cヘテロ欠損型またはホモ欠損型メラノーマ組織に由来する細胞株を解析したところ、どちらもヌードマウスで腫瘍を形成したが、Ppp6cヘテロ欠損型由来の腫瘍はホモ欠損型の腫瘍よりも早い成長が見られた。Ppp6cヘテロ欠損型のPpp6cをsiRNAでノックダウンすると、ゲノム損傷の蓄積が促進され、siRNAコントロールと比較してアポトーシスが促進された。
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[Journal Article] Ppp6c haploinsufficiency accelerates UV-induced BRAF(V600E)-initiated melanomagenesis.2021
Author(s)
Kanazawa K, Kishimoto K, Nomura M, Kurosawa K, Kato H, Inoue Y, Miura K, Fukui K, Yamashita Y, Sato I, Tsuji H, Watanabe T, Tanaka T, Yasuda J, Tanuma N, Shima H
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Journal Title
Cancer Sci.
Volume: 112(6)
Pages: 2233-2244
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Ppp6c deficiency accelerates K-ras(G12D)-induced tongue carcinogenesis.2021
Author(s)
Kishimoto K, Kanazawa K, Nomura M, Tanaka T, Shigemoto-Kuroda T, Fukui K, Miura K, Kurosawa K, Kawai M, Kato H, Terasaki K, Sakamoto Y, Yamashita Y, Sato I, Tanuma N, Tamai K, Kitabayashi I, Matsuura K, Watanabe T, Yasuda J, Tsuji H, Shima H
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Journal Title
Cancer Med.
Volume: 10(13)
Pages: 4451-4464
DOI
Peer Reviewed / Open Access
